TXA2R基因多態(tài)性在腦梗死發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、腦梗死（Cerebralinfarction，CI）是指各種原因引起的腦部血液供應(yīng)障礙，使局部腦組織發(fā)生不可逆損害，其高發(fā)病率、致殘率和死亡率，嚴(yán)重威脅著人類(lèi)生命和健康，現(xiàn)已成為世界范圍內(nèi)的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題。目前腦梗死的發(fā)病機(jī)制尚不明確，可能是受遺傳、環(huán)境和血管危險(xiǎn)因素共同作用的多因子復(fù)雜疾病。
　　血栓素A2受體(ThromboxaneA2receptor，TXA2R)在血小板上廣泛分布，能夠通過(guò)與其配體血栓素A2(TXA2)結(jié)

2、合后使血小板活化，導(dǎo)致血小板黏附和聚集。多項(xiàng)研究已經(jīng)證實(shí)，TXA2R基因多態(tài)性與CI密切相關(guān)，并且有可能引起TXA2R的功能改變，進(jìn)而影響其與配體的結(jié)合，觸發(fā)一系列細(xì)胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)放大，導(dǎo)致信號(hào)傳遞途徑改變，最終形成穩(wěn)定的血栓，其中整合素GPⅡb/Ⅲa主要通過(guò)其β3亞單位參與調(diào)控“內(nèi)-外”及“外-內(nèi)”雙向信號(hào)傳導(dǎo)。
　　為了將TXA2R基因多態(tài)性、整合素信號(hào)傳導(dǎo)通路與腦梗死聯(lián)系起來(lái)，本課題根據(jù)我們前期的研究，采用聚合酶鏈反應(yīng)—高溫連

3、接酶檢測(cè)反應(yīng)技術(shù)(PCR-LDR)，對(duì)中國(guó)230例腦梗死患者和143名健康人進(jìn)行了TXA2R基因C795T、T924C和G1686A三個(gè)外顯子及啟動(dòng)子rs768963位點(diǎn)的多態(tài)性與腦梗死的關(guān)系研究，并且選擇外顯子C795T、G910A和T924C，構(gòu)建野生型和突變型TXA2R真核表達(dá)質(zhì)粒，分別轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞和血小板整合素穩(wěn)定表達(dá)的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞。
　　研究結(jié)果表明，rs768963的多態(tài)性與CI密切相關(guān)，而三個(gè)外

4、顯子的突變可能并不直接參與CI的發(fā)生，而是彼此或與啟動(dòng)子等其他位點(diǎn)之間形成連鎖不平衡關(guān)系，通過(guò)單倍型發(fā)揮作用，間接影響著CI的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn);在HEK293細(xì)胞模型中，多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Ca2+內(nèi)流信號(hào)變化，G910A點(diǎn)突變可能抑制TXA2R的活化，而C795T和T924C則增強(qiáng)TXA2R的活化。在GPⅡb/Ⅲa-CHO細(xì)胞模型中，流式細(xì)胞儀檢測(cè)與游離AlexaFluor647-Fg的結(jié)合能力，G910A點(diǎn)突變可能抑制整合素活化和與配體的