異硫氰酸芐基酸對(duì)人舌鱗癌細(xì)胞生長的影響.pdf

1、目的：異硫氰酸酯是天然存在于辣根、芥末、甘藍(lán)、花椰菜、卷心菜和水芹菜等十字花科蔬菜中的硫代葡萄糖苷的降解產(chǎn)物,研究表明異硫氰酸酯具有高度的生物活性,如殺菌、抑制血小板聚集等作用。流行病學(xué)研究結(jié)果表明經(jīng)常食用十字花科蔬菜能夠降低人們患肺癌、胃癌、前列腺癌、腸道癌的危險(xiǎn),并證實(shí)其所含的異硫氰酸酯化合物(isothiocyanates,ITCs)具有防癌、抑癌作用。同時(shí)也是十字花科蔬菜最主要的抗腫瘤活性成分。
　　 方法：本研究以人舌

2、鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Cal-27和SCC-9為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,分別采用2-對(duì)磺酸基苯基-3-(4,5-二甲基噻唑)-5-(3-羧甲氧基苯基)-二氫四唑嗡鹽(MTS)檢測(cè)法、細(xì)胞形態(tài)觀察、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期觀察BITC對(duì)人舌鱗癌細(xì)胞生長的影響以及用Western Blot法檢測(cè)最具代表性的異硫氰酸酯--異硫氰酸芐基酯(Benzyl-isothiocyanate,BITC)對(duì)人舌鱗癌細(xì)胞Caspase8,Caspase9,Caspase

3、3蛋白表達(dá)的影響,通過探討B(tài)ITC對(duì)舌鱗癌細(xì)胞增殖、凋亡的作用,了解異硫氰酸酯能否用于舌癌的預(yù)防。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,當(dāng)BITC的濃度為7.5μM作用48 h時(shí),舌鱗癌細(xì)胞的抑制率為56.2％,與DMSO對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05)。在倒置顯微鏡下觀察經(jīng)7.5μM BITC作用48 h后的人舌鱗癌細(xì)胞,其細(xì)胞形態(tài)與DMSO對(duì)照組相比有明顯的差異。經(jīng)2.5μM、5μM、7.5μM BITC作用48 h后的人舌鱗癌

4、細(xì)胞的凋亡率分別為3.7％、6.2％、8.6％,呈一定的量效關(guān)系。BITC作用24 h后的人舌鱗癌細(xì)胞G2／M期細(xì)胞比例增加,且有顯著性差異,說明細(xì)胞在BITC作用下,細(xì)胞周期阻滯在G2／M期。Caspase8,Caspase9,Caspase3蛋白表達(dá)水平隨著BITC濃度增加而逐漸呈上升趨勢(shì),與BITC誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡結(jié)果一致。
　　 結(jié)論：本研究BITC通過抑制人舌鱗癌細(xì)胞的增殖,并通過Caspase8,9和3途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,