抗PEDV高免卵黃抗體的制備及其初步應(yīng)用.pdf

1、豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED)是由冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)引起豬的一種高急性、傳染性腸道病毒病。此疫病的流行和傳播，已嚴(yán)重影響到我國(guó)養(yǎng)豬行業(yè)的發(fā)展。當(dāng)前疫苗免疫是防治我國(guó)豬群PED的主要手段，但效果不佳，且該病在治療方面尚無(wú)特效藥物。目前，仔豬流行性腹瀉在全國(guó)各大小豬場(chǎng)頻繁發(fā)生。疫情以發(fā)病快、傳播迅速、范圍廣、發(fā)病

2、率高、死亡率高、造成損失嚴(yán)重等特點(diǎn)，主要侵染1周齡左右的產(chǎn)房仔豬，發(fā)病率最高達(dá)100％，死亡率90%以上?；疾∽胸i病癥常表現(xiàn)為：精神抑郁，嗜睡，食欲不振，脫水，身形消瘦，被毛粗亂，糞便呈黃色、黃白色以及棕色水樣從肛門(mén)排出，嘔吐時(shí)常伴有未消化的凝乳塊。剖檢后觀察到的病理變化主要有：腸系膜、腸系膜淋巴結(jié)、腹股溝淋巴結(jié)腫大出血，腸內(nèi)多為腥臭的黃色或者褐色液體。本病的發(fā)生，給新生仔豬的存活帶來(lái)嚴(yán)重威脅，使養(yǎng)豬業(yè)損失慘重。為了制備抗PEDV高免卵

3、黃抗體并探究其在仔豬PED防治中的應(yīng)用效果，開(kāi)展了如下三方面的研究：
　　1.抗PEDV高免卵黃抗體如何制備的研究。本次研究采用RT-PCR檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的仔豬整段小腸，制成PEDV油乳劑滅活抗原用于蛋雞的免疫，利用本實(shí)驗(yàn)室已建立ELISA方法檢測(cè)卵黃抗體水平，并以此為標(biāo)準(zhǔn)收集抗體水平最高時(shí)間段的雞蛋。繼續(xù)采用瓊脂擴(kuò)散法收集抗體效價(jià)大于26的高免蛋，利用酸化水法提取卵黃抗體液，經(jīng)無(wú)菌安全試驗(yàn)后實(shí)際用于仔豬PED的防治。
　　

4、2.抗PEDV高免卵黃抗體用于仔豬PED治療效果的研究。本次研究，分別選取江蘇鹽城、安徽長(zhǎng)豐、安徽阜南三家豬場(chǎng)各70、139、160頭30日齡內(nèi)PEDV呈陽(yáng)性的腹瀉仔豬作為治療對(duì)象。分為自然發(fā)病，抗生素、補(bǔ)液鹽治療和卵黃抗體治療三組，其中自然發(fā)病116頭，抗生素、補(bǔ)液鹽治療94頭，卵黃抗體治療159頭。結(jié)果顯示：自然發(fā)病組仔豬存活率僅為9.4%；采用抗生素、補(bǔ)液鹽治療組存活率達(dá)到了17%；而采用卵黃抗體治療組存活率高達(dá)79.9%，說(shuō)明抗

5、PEDV高免卵黃抗體治療仔豬PED效果顯著。且治療中發(fā)現(xiàn)，病程越短，發(fā)病日齡越高的仔豬治療效果越好。卵黃抗體治療仔豬與自然發(fā)病對(duì)照仔豬相比，體內(nèi)排泄的病毒量呈顯著減少趨勢(shì)，糞便由惡臭水樣至膏狀至固體顆粒狀，精神、食欲恢復(fù)，不再嘔吐腹瀉直至痊愈。
　　3.抗PEDV高免卵黃抗體用于仔豬PED預(yù)防效果的研究。本次研究，選取正在爆發(fā)PED的安徽長(zhǎng)豐某豬場(chǎng)12小時(shí)內(nèi)新生未感染PEDV仔豬85頭；安徽阜南某豬場(chǎng)12小時(shí)內(nèi)新生未感染PEDV仔

6、豬29頭作為預(yù)防對(duì)象。其中，卵黃抗體預(yù)防組62頭，對(duì)照組52頭。結(jié)果顯示，抗PEDV高免卵黃抗體預(yù)防組發(fā)病率為9.8%，存活率為96.8%；對(duì)照組發(fā)病率為59.6%，存活率為46.2%。說(shuō)明采用抗PEDV高免卵黃抗體對(duì)新生仔豬進(jìn)行預(yù)防，能很大程度降低仔豬感染PEDV的概率，從而保證新生仔豬的存活率。
　　但抗PEDV高免卵黃抗體在實(shí)際臨床防治應(yīng)用中的效果，可能會(huì)受到仔豬自身疾病，病情發(fā)展?fàn)顩r，豬場(chǎng)飼養(yǎng)管理及防疫措施等各方面因素的影