抗咽喉炎鏈球菌雞卵黃抗體的制備及檢測(cè).pdf

1、口腔和咽喉疾病是人類的常見疾病,主要是由于細(xì)菌感染所引起的,經(jīng)過研究測(cè)定,主要的感染菌為鏈球菌、葡萄球菌和肺炎雙球菌等。雖然口腔和咽喉疾病不會(huì)馬上引起人類死亡,但由于其病種多樣化,容易復(fù)發(fā),難以根治,且由其所引發(fā)的許多并發(fā)癥給人類的生活和工作帶來(lái)很多不便和麻煩。因此,關(guān)于口腔及咽喉疾病的治療一直受到人們的關(guān)注。
　　 目前,人類抗細(xì)菌及病毒主要依賴抗生素,但是由于抗生素治療會(huì)產(chǎn)生很多不良后果,包括身體機(jī)能協(xié)調(diào)機(jī)制的紊亂化副作用,

2、細(xì)菌、病毒的耐藥性幾率增加等。近年來(lái),人們開始從免疫學(xué)的角度進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)用IgY技術(shù)可以產(chǎn)生針對(duì)耐藥菌的抗體,可治療由細(xì)菌或病毒感染引起的疾病,具有安全無(wú)殘留、不產(chǎn)生抗藥性、價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn),是一種具有廣闊應(yīng)用前景的抗生素替代品。
　　 本研究制備了抗肺炎鏈球菌、MG溶血性鏈球菌特異性卵黃抗體,然后通過SDS-PAGE凝膠電泳、考馬斯亮藍(lán)染色法、抑菌試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、交叉反應(yīng)試驗(yàn)對(duì)其生物活性進(jìn)行鑒定,并對(duì)IgY的熱穩(wěn)定性、酸堿

3、穩(wěn)定性以及對(duì)消化酶的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究。
　　 結(jié)果表明,乙酸-乙酸鈉緩沖液、PEG6000和硫酸銨溶液三步法提純得到的IgY純度可達(dá)到95％左右；間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)表明,母雞首次免疫10 d后,卵黃中即有抗體產(chǎn)生,初次免疫20 d后效價(jià)逐步上升,高效價(jià)出現(xiàn)在初次免疫后40 d～80 d,抗肺炎鏈球菌特異性卵黃抗體的效價(jià)最高可以達(dá)到1:5120,抗MG溶血性鏈球菌特異性卵黃抗體的效價(jià)最高可以達(dá)到1:2560；體外抑