胚胎干細(xì)胞在內(nèi)膜損傷小鼠宮腔內(nèi)移植的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：子宮內(nèi)膜損傷是婦產(chǎn)科醫(yī)生臨床上經(jīng)常遇到的問題，其治療策略最重要的一點(diǎn)是促進(jìn)子宮內(nèi)膜再生和功能恢復(fù)，而對于局部重度或廣泛的內(nèi)膜損傷，目前的治療方法尚難以解決子宮內(nèi)膜重新再生問題，是臨床治療上的棘手問題。隨著近年來干細(xì)胞分化理論深入研究，干細(xì)胞應(yīng)用于臨床治療的研究也越來越多，這為子宮內(nèi)膜損傷治療提供了一種新的理念，由于胚胎干細(xì)胞(Embryonic stemcells，ESC)有很高的再生和分化潛能，胚胎干細(xì)胞于其內(nèi)膜損傷內(nèi)移植，為干

2、進(jìn)一步研究細(xì)胞治療子宮內(nèi)膜損傷奠定基礎(chǔ)。
　　 目的：研究小鼠胚胎干細(xì)胞移植入內(nèi)膜損傷小鼠宮腔內(nèi)后的存活與遷徙情況。
　　 方法：利用MEF作為飼養(yǎng)層培養(yǎng)EGFP+ES細(xì)胞，于ICR小鼠腎被膜下移植，4周后對移植后腫物HE染色及nestin、α-SMA和AFP免疫組化染色觀察；用熱損傷處理子宮內(nèi)膜方法制備ICR小鼠子宮內(nèi)膜損傷模型，并進(jìn)行一系列的時間觀察損傷后子宮內(nèi)膜情況；急性損傷后移植一定量(3-4×105個)未分化的

3、GFP+小鼠胚胎干細(xì)胞至內(nèi)膜損傷小鼠宮腔內(nèi)，14天后取子宮，直接熒光顯微鏡觀察和HE染色后及抗GFP蛋白抗體免疫組化染色后顯微鏡下觀察小鼠胚胎干細(xì)胞的存活和遷徙情況。
　　 結(jié)果：ES細(xì)胞在成纖維飼養(yǎng)層細(xì)胞上生長良好，呈克隆狀生長，熒光顯微鏡下觀察ESC有明顯EGFP表達(dá)，發(fā)出綠色熒光，腎被膜下移植后有三個胚層標(biāo)記表達(dá)(nestin、α-SMA和AFP)的畸胎瘤形成；子宮內(nèi)膜熱損傷處理后至14d天HE染色觀察子宮內(nèi)膜沒有修復(fù)表現(xiàn)