粘蟲細(xì)胞培養(yǎng)及對六種天然生物源活性物質(zhì)毒力研究.pdf

1、本文主要就粘蟲細(xì)胞培養(yǎng)及對六種天然生物源活性物質(zhì)毒力進(jìn)行了研究，主要內(nèi)容如下： 1.細(xì)胞培養(yǎng) 以東方粘蟲不同蟲態(tài)為材料進(jìn)行了胚胎細(xì)胞、血淋巴細(xì)胞、脂肪體細(xì)胞、中腸細(xì)胞和肌肉細(xì)胞的原代培養(yǎng)，結(jié)果如下： 胚胎細(xì)胞：出現(xiàn)兩種類型的細(xì)胞，一株經(jīng)10個月原代培養(yǎng)，開始傳代，細(xì)胞呈現(xiàn)卵圓形，貼壁生長，目前已經(jīng)傳至3代；而另一株培養(yǎng)4個月，出現(xiàn)單個胚胎細(xì)胞變長，呈梭形，5個月分裂成扇形向周圍擴散，7個月，細(xì)胞束周圍有小而圓亮的

2、單個細(xì)胞。 肌肉細(xì)胞：肌纖維松散，有大量的肌衛(wèi)星細(xì)胞分離，成肌細(xì)胞橫紋相間排列，細(xì)胞膜完整；貼壁后很多肌衛(wèi)星細(xì)胞由圓形變?yōu)樗笮?，胞體飽滿，兩端尖細(xì)，呈桿狀，觀察到肌衛(wèi)星細(xì)胞的分裂。 脂肪體細(xì)胞：5d后出現(xiàn)氣泡狀并向四周蔓延，1個月后氣泡逐漸消失并出現(xiàn)排列緊密的卵狀細(xì)胞，50d細(xì)胞向四周發(fā)散，3個月后細(xì)胞鋪滿瓶底，開始傳代，傳代后生長緩慢，呈團(tuán)狀集聚。 中腸細(xì)胞：中腸細(xì)胞發(fā)出現(xiàn)兩種不同類型的細(xì)胞，其中柱型細(xì)胞于3個

3、月后出現(xiàn)，4個月呈扇形分裂；梭型細(xì)胞于2個月后出現(xiàn)，隨后開始分裂成簇。5個月后有單細(xì)胞從細(xì)胞簇團(tuán)上游離并繼續(xù)貼壁繁殖。 血淋巴細(xì)胞：2個月細(xì)胞密度明顯減小，少數(shù)細(xì)胞變亮，5個月個別細(xì)胞開始變粗變長；6個月細(xì)胞明顯分裂顯現(xiàn)，出現(xiàn)單個細(xì)胞克隆團(tuán)。 2.細(xì)胞毒力測定 苦皮藤素Ⅳ、苦皮藤素Ⅴ處理胚胎細(xì)胞24h后，觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞裂解，出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片，培養(yǎng)基變渾濁，其對粘蟲胚胎細(xì)胞的致死中濃度分別為76.42和129.3μg

4、/mL；苦皮藤素Ⅳ、Ⅴ處理后的粘蟲中腸細(xì)胞在24h內(nèi)逐漸減少而培養(yǎng)基依然保持澄清，相反杠柳提取物415[＃]和3[＃]可以使細(xì)胞逐漸分解而培養(yǎng)基同時變渾濁。 六種天然生物源殺蟲活性物質(zhì)苦皮藤素Ⅳ、Ⅴ、WML-1、WML-2、415[＃]、3[＃]對粘蟲中腸細(xì)胞的致死中濃度分別為34.93、7.716、215.7、21.51、10.22和10.56μg/mL；對粘蟲血細(xì)胞的致死中濃度都在100μg/mL以下，其致死中濃度分別為37