干預Hedgehog信號通路對體外培養(yǎng)人腦膠質瘤腫瘤干細胞影響的實驗研究.pdf

1、目的：體外無血清培養(yǎng)原代人腦膠質瘤腫瘤干細胞及其特性的鑒定；檢測Hedgehog信號通路在膠質瘤腫瘤干細胞中的表達以及Hedgehog信號通路抑制劑環(huán)靶明對體外原代培養(yǎng)的人腦膠質瘤腫瘤干細胞生長及增殖影響。
　　方法：將我院神經(jīng)外科手術切除的膠質母細胞瘤標本分離、培養(yǎng)出膠質瘤腫瘤干細胞。行免疫組化及熒光染色鑒定膠質瘤腫瘤干細胞及其腫瘤干細胞特性和Hedgehog信號通路在其的表達。使用CCK-8測定Hedgehog信號通路抑制劑環(huán)

2、靶明對膠質瘤干細胞增殖-毒性的影響。
　　結果：
　　1.使用無血清培養(yǎng)技術培養(yǎng)的懸浮狀的細胞團表達CD133和Nestin標記物，其具有無限增值、自我更新能力，10％胎牛血清培養(yǎng)基誘導可分化為膠質瘤細胞。
　　2.Hedgehog信號通路關鍵蛋白Sonic Hedgehog和Smo在膠質瘤腫瘤干細胞中表達。
　　3. CCK-8結果顯示：分別使用Hedgehog信號通路抑制劑0.5,1,5umol/L環(huán)靶明對膠

3、質瘤干細胞的生長抑制率依次為（21.93±6.57）%，（32.03±9.13）%，（47.78±16.09）%，（P<0.01）,表明環(huán)靶明可顯著抑制膠質瘤腫瘤干細胞的生長增殖，且與濃度呈依賴性；作用時間為4,12,24,36,48,60h環(huán)靶明對干細胞的生長抑制率依次為（25.89±7.11）%，（28.00±10.00）%，（32.98±16.87）%，（35.83±17.44）%，（41.31±16.12）%，（41.58±19