Ad5CMVeNOS轉(zhuǎn)導靜脈橋?qū)θi動脈旁路移植術后血管狹窄影響——體外研究及機制探索.pdf

1、全文共由四部分組成.第一部分：重組內(nèi)皮一氧化氮合酶腺病毒擴增純化及病毒滴度滴定;目的：在心血管疾病中,常有內(nèi)皮一氧化氮合酶（eNOS）和NO的產(chǎn)生發(fā)生改變.因此在心血管疾病基因治療中,eNOS基因成為一個具有吸引力的目的基因.同時由于腺病毒載體是高效的載體系統(tǒng),故采用腺病毒介導的重組內(nèi)皮一氧化氮合酶（Ad5CMVeNOS）進行相關實驗研究.結(jié)論：成功地進行了兩種重組腺病毒擴增及純化,達到了高病毒滴度的重組腺病毒,為進一步開展血管疾病基因

2、治療的體外體內(nèi)實驗研究,作好了充分的準備工作.第二部分：Ad5CMVeNOS在成纖維細胞水平上轉(zhuǎn)染與表達;目的：由于血管外膜的成纖維細胞也成為血管狹窄,特別是血管向內(nèi)再構的主要原因,外膜成纖維細胞增生并遷移,更主要是向肌成纖維細胞的分化,成為新內(nèi)膜形成和血管再構的原因之一.故外膜成為目前基因治療的研究熱點,為此在成纖維細胞水平上進行了轉(zhuǎn)染實驗研究.結(jié)論：Ad5CMVeNOS體外能有效轉(zhuǎn)染小鼠成纖維細胞PA317,并獲得蛋白表達.這種作用

3、為重組內(nèi)皮一氧化氮合酶通過血管局部轉(zhuǎn)染,以血管外膜作為治療途徑之一提供了理論依據(jù).第三部分：重組腺病毒對不同表達細胞和血管環(huán)轉(zhuǎn)染的體外研究;目的：比較重組腺病毒對不同細胞、特別對血管細胞的轉(zhuǎn)染和對人冠狀動脈旁路移植動脈靜脈血管的轉(zhuǎn)導,為攜帶目的基因的重組腺病毒治療血管狹窄提供更好的轉(zhuǎn)染途徑.結(jié)論：從細胞水平上證明了腺病毒載體能將治療性目的基因?qū)敫鞣N血管細胞,從組織水平上證明了動脈和靜脈血管都獲得了蛋白表達.提示不僅血管內(nèi)膜和外膜都能被

4、重組腺病毒有效轉(zhuǎn)染;而且從理論上間接說明臨床無論動脈或靜脈的血管狹窄都可用腺病毒作為載體運行基因治療和預防.第四部分：Ad5CMVeNOS對犬頸動脈旁路移植術后靜脈橋狹窄影響及機制探索;目的：為冠狀動脈旁路移植術后大隱靜脈近期和遠期血管再狹窄提供一種有效的基因治療手段,避免目前使用的血管內(nèi)加壓灌注造成的內(nèi)皮損傷和血流沖洗等缺點,更好地進行臨床干預和治療.我們觀察了Ad5CMVeNOS通過局部轉(zhuǎn)移方法對犬頸動脈旁路移植術后靜脈橋血管狹窄的