山東省某豬場豬瘟病例的診斷及病毒分離鑒定.pdf

1、豬瘟(Classical Swine Fever, CSF)是由黃病毒科瘟病毒屬的豬瘟病毒(Classical Swine Fever Virus, CSFV)引起豬的一種高度接觸傳染的烈性傳染病，被我國定為 A類傳染病。雖然采取了法定免疫防制措施，該病仍在全國范圍內(nèi)不斷流行，而且豬瘟流行態(tài)勢日趨復(fù)雜，豬瘟典型病例時(shí)有發(fā)生，非典型豬瘟廣為流行。發(fā)病豬群主要集中在保育階段及育肥前期，病豬多表現(xiàn)發(fā)熱、厭食、精神沉郁等熱性疾病的一般性癥狀，發(fā)

2、病率高、死亡率不低；母豬被感染后多表現(xiàn)為繁殖障礙、持續(xù)感染、隱性感染和免疫耐受，當(dāng)與其它病原混合感染時(shí)，能顯著加重患病豬的病情，死亡率明顯升高。
　　2015年5月山東省萊蕪市某豬場保育豬群發(fā)生以高熱（40.8～41.5℃）、精神沉郁、食欲不振、皮膚潮紅及耳尖發(fā)紺為主要特征的急性熱性傳染病，且發(fā)病豬只肌注退燒藥后，未見明顯療效。為明確引起此次疫情的致病因素，在對病豬群進(jìn)行系統(tǒng)的臨床癥狀觀察和病史調(diào)查后，初步懷疑豬瘟，對患病豬進(jìn)行了

3、病理剖檢、組織病理學(xué)檢查、分子生物學(xué)檢測、病毒分離與鑒定，對分離病毒又進(jìn)行了E2基因的分子克隆測序及同源性比對試驗(yàn)。大體剖檢及組織病理學(xué)檢查結(jié)果顯示病豬具有豬瘟病毒感染的特征性病變，如全身淋巴結(jié)出血性壞死性炎癥、脾臟邊緣灶狀出血性梗死、病毒性腦炎等，初步確定該病由豬瘟病毒感染引起。分子生物學(xué)檢測及病毒分離結(jié)果表明，送檢的病料中僅檢測到豬瘟病毒，并分離到一株豬瘟病毒（SDLW2015）。該毒株E2基因全長為1119個(gè)堿基，編碼373個(gè)氨基

4、酸；相似性分析表明， SDLW2015與其它參考毒株的核苷酸相似性介于82.1％～96.3%之間，氨基酸相似性介于88.5%～97.6%之間。與1.1亞群的HCLV株相比具有最低的核苷酸（82.1%）和氨基酸相似性（88.5%）。而與2.1亞群的參考毒株具有較高的核苷酸（91.8%～96.3%）和氨基酸相似性（93%～97.6%）。其中與2.1b亞型參考毒株（GXWZ02）的相似性最高，核苷酸為96.3%，氨基酸為97.6%。另外，新分

5、離株與2.1d亞型的同源性高于2.1a或2.1c，表明2.1b亞型和2.1d亞型具有較高的相似度，這與之前的報(bào)道一致。
　　隨后，我們將新分離株SDLW2015與27株參考序列構(gòu)建了系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹，結(jié)果表明，這28株病毒被分到了3個(gè)基因群（1、2、3）、8個(gè)基因亞群（1.1～1.4、2.1～2.3、3.4）。其中，2.1亞群又被進(jìn)一步劃分為2.1a、2.1b、2.1c及一個(gè)新被定義的2.1d基因亞群。此次分離到的豬瘟毒株在進(jìn)化樹中

6、屬于2.1b亞群，與傳統(tǒng)的石門毒株（1.1）或兔化弱毒疫苗毒株（HCLV，1.1）基因型存在較大差異。
　　該病被檢測確診為豬瘟后，對發(fā)病豬群采取了豬瘟疫苗緊急免疫，并對該場的豬瘟免疫程序進(jìn)行了調(diào)整。后期電話回訪得知，該場疫情很快得到了控制，豬場已恢復(fù)了正常生產(chǎn)。為了監(jiān)測該場各豬群豬瘟免疫狀態(tài)，對該場各階段豬群進(jìn)行了采血，共采集血液樣本93份，檢測結(jié)果顯示豬瘟抗體陽性74份，整體陽性率為79.57%。不同階段的豬群抗體陽性率在62

7、.50%～87.50%之間，平均阻斷率在41.29%～88.18%之間，差異比較明顯，這符合感染豬群的基本特征。其中以后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬的抗體陽性率和平均阻斷率最高，保育豬的抗體陽性率及平均阻斷率最低。
　　經(jīng)過綜合診斷最終確定該場疫情是由豬瘟病毒感染引起，毒株屬于2.1亞群中的2.1b亞型，基于豬瘟的綜合防控措施使疫情得到了迅速控制。由于本研究的局限性，未能對該分離毒株的分子生物學(xué)特性、抗原性及病毒毒力等進(jìn)行更深入的探究。另外，