胰腺癌細(xì)胞抵抗吉西他濱誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡的機(jī)制研究.pdf

1、胰腺癌是死亡率最高的惡性腫瘤之一，胰腺癌的致死性主要是由于其化療藥物抵抗能力，這與胰腺癌細(xì)胞死亡信號(hào)通路的改變密切相關(guān)。以往大家普遍認(rèn)為腫瘤細(xì)胞化療耐藥的機(jī)制一般為對(duì)細(xì)胞凋亡的抵抗，細(xì)胞凋亡的抵抗機(jī)制一直是研究的熱門(mén)話題。然而越來(lái)越多的證據(jù)表明，腫瘤細(xì)胞死亡方式呈現(xiàn)多樣化。深入理解化療藥物誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞死亡形式及信號(hào)通路的變化對(duì)于腫瘤化療耐藥的克服及藥靶的開(kāi)發(fā)具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。
　　程序性壞死是近幾年發(fā)現(xiàn)的另一種程序性細(xì)胞死

2、亡形式，與凋亡相似，是可調(diào)控的細(xì)胞死亡形式。一般在凋亡信號(hào)通路受到阻斷，caspase活性受到抑制的條件下發(fā)生，這一特質(zhì)也恰恰使程序性壞死具有了克服腫瘤化療耐藥的潛質(zhì)，而且使得程序性壞死在耐藥方面的研究成為熱點(diǎn)。但是，程序性壞死在傳統(tǒng)化療藥物誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞死亡抵抗中是否發(fā)揮作用，凋亡和程序性壞死在腫瘤細(xì)胞死亡抵抗中發(fā)揮怎樣的作用，調(diào)控腫瘤細(xì)胞死亡形式及死亡抵抗的關(guān)鍵分子有哪些還不明確，本研究就是要針對(duì)這些問(wèn)題進(jìn)行初步探究。
　　在

3、本研究中，我們首先分析了168例胰腺癌病人樣本，發(fā)現(xiàn)RIP3的表達(dá)水平與胰腺癌病人的總體生存時(shí)間顯著相關(guān)，RIP3高表達(dá)是胰腺癌病人死亡的危險(xiǎn)因素。然后我們?cè)诩?xì)胞水平進(jìn)行了研究，我們篩選出能夠發(fā)生程序性壞死的胰腺癌細(xì)胞株CFPAC-1，我們發(fā)現(xiàn)吉西他濱誘導(dǎo)該細(xì)胞的死亡不會(huì)被全caspase抑制劑Z-VAD-fmk阻斷，卻能夠被程序性壞死抑制劑 Nec-1部分阻斷，且透射電鏡結(jié)果顯示，吉西他濱能夠誘導(dǎo)CFPAC-1發(fā)生凋亡和壞死，。我們用

4、吉西他濱誘導(dǎo)CFPAC-1細(xì)胞獲得了IC50為20μM的耐藥細(xì)胞株R1、R2。另外，我們發(fā)現(xiàn)該耐藥細(xì)胞株獲得了抵抗凋亡和程序性壞死的能力。我們首次在腫瘤耐藥模型中研究了程序性壞死的作用。我們發(fā)現(xiàn)在胰腺癌耐藥細(xì)胞株中，RIP3、CD147、p-Drp1的表達(dá)水平顯著上調(diào)。干涉RIP3能夠促進(jìn)吉西他濱誘導(dǎo)的耐藥腫瘤細(xì)胞的死亡，對(duì)CFPAC-1細(xì)胞沒(méi)有顯著作用。另外，干涉CD147或者利用CD147的單克隆抗體Hab18/6H8阻斷聯(lián)合吉西他