褪黑素(melatonin)對(duì)小鼠中小直徑TG神經(jīng)元T型鈣電流的影響及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究褪黑素（melatonin）預(yù)防和治療偏頭痛的可能機(jī)制；研究褪黑素對(duì)小鼠三叉神經(jīng)節(jié)中小直徑神經(jīng)元T-型鈣電流的作用及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制。
　　方法：利用分子生物學(xué)的一些方法（主要包括 RT-PCR、western blot、immunofluorescence）對(duì)褪黑素受體（MTR）在小鼠三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元（TG）上的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。利用全細(xì)胞膜片鉗的技術(shù)研究褪黑素（melatonin）對(duì)小鼠中小直徑三叉神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元T型鈣電流的

2、作用，并用藥理學(xué)方法研究其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。
　　結(jié)果：本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：（1）無(wú)論從 RNA水平（RT-PCR）還是從蛋白水平（western blot、immunofluorescence），實(shí)驗(yàn)結(jié)果都證實(shí)了褪黑素受體（MTR）的表達(dá)。（2）褪黑素（melatonin）對(duì)小鼠三叉神經(jīng)節(jié)中小直徑的神經(jīng)元 T-型鈣電流具有計(jì)量依賴性的抑制作用。100nM濃度的褪黑素對(duì)該電流的抑制作用約為15%。（3）褪黑素可以使該電流的失活曲線顯著

3、性左移，而對(duì)其激活曲線沒有顯著性作用。（4）褪黑素受體的阻斷劑、褪黑素2型受體的阻斷劑、G蛋白的阻斷劑(GDP-β-S)、磷脂酶C（PLC）的阻斷劑（U73122）、PKC的阻斷劑（白屈菜氏堿、GF109203x），novel PKCη的特異性阻斷劑能夠翻轉(zhuǎn)褪黑素對(duì)該T-型鈣電流的抑制作用。然而，無(wú)論是G i/o還是Gs的阻斷劑PTX、CTX都不能翻轉(zhuǎn)該種抑制作用。同樣，PKA的選擇性阻斷劑H89以及PKI6-22也都不能翻轉(zhuǎn)該種抑制作