端粒酶測定方法的建立及食管癌與端粒酶相關關系的研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學中國醫(yī)學科學院碩士學位論文端粒酶測定方法的建立及食管癌與端粒酶相關關系的研究姓名：張傳寶申請學位級別：碩士專業(yè)：臨床檢驗診斷學指導教師：張克堅郭健2002.1.1行了端粒酶活性測定。結果：1我們選擇的TRAP方法：i、延伸條件：25oC水浴30分鐘：ii、火活端粒酶：90oc保溫3分鐘：ii、PCR條件：900C／45秒，50oC／45秒，72oC／60秒，循環(huán)35次；iii電泳條件：15％聚丙烯酰胺電泳，電壓為150V

2、；2確定的銀染方法：i小心取下凝膠，在100ml的固定液(1O％乙醇，05％乙酸)中固定10分鐘；ii在固定液中加入06％的硝酸銀溶液50ml，使終濃度為02％，染色l0分鐘；iii棄去固定液，用蒸餾水漂洗兩次：一次20秒，一次2分鐘；iii加入200ml冠色液(3％NaOH，05％甲醛)輕輕晃動，直至產物信號足夠強而背景不致過高為止：iv用100ml固定液固定5分鐘，終止反應，蒸餾水漂沈10分鐘，照相保存Y／結合TRAP和銀染建立了測