改良2-VO法制備的大鼠VD模型及迷迭香復(fù)合精油改善其學(xué)習(xí)記憶的實驗研究.pdf

1、目的:探討改良的雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法制備的大鼠慢性大腦灌注不足引起的血管性癡呆模型的穩(wěn)定性和可靠性,并通過給予吸嗅迷迭香復(fù)合精油觀察其對于大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能、海馬CA1區(qū)的形態(tài)學(xué)及膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶表達(dá)的影響。
　　方法:1)采用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法(2-VO)法造成大鼠永久慢性大腦灌注不足導(dǎo)致的血管性癡呆(VD)模型。雄性2月齡SD大鼠48只,隨機分為傳統(tǒng)2-VO組20只,改良2-VO組20只和假手術(shù)組8只。傳統(tǒng)組同時結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈;

2、改良組先結(jié)扎右側(cè)頸總動脈,1w后再次結(jié)扎左側(cè)的頸總動脈。在術(shù)后48h和60d記錄各組的存活率,2個月后進行水迷宮試驗來測定大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶和運動能力。水迷宮試驗結(jié)束后處死大鼠,觀察海馬和紋狀體的形態(tài)學(xué)變化。
　　2)采用改良的2-VO法造成大鼠永久慢性大腦灌注不足導(dǎo)致的血管性癡呆(VD)模型。雄性2月齡SD大鼠60只,隨機分為正常對照組(n=10),假手術(shù)組(n=10),改良的2-VO法造模48h后成活大鼠再次隨機分為模型組(n

3、=10),迷迭香復(fù)合精油組(n=10)和依達(dá)拉奉組(n=10)。迷迭香復(fù)合精油組給予吸嗅用三種具有醒腦開竅的迷迭香,丁香和薄荷精油配制成的復(fù)合精油,依達(dá)拉奉組給予腹腔注射依達(dá)拉奉注射液,各持續(xù)65d。通過水迷宮試驗來觀察大鼠造模后有無學(xué)習(xí)記憶功能減退和吸嗅迷迭香復(fù)合精油后學(xué)習(xí)記憶能力有無改善,并采用免疫組化技術(shù)觀察海馬CA1區(qū)組織形態(tài)學(xué)變化和與學(xué)習(xí)記憶有關(guān)的膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶表達(dá)的變化。
　　結(jié)果:1)改良組與傳統(tǒng)組大鼠術(shù)后48h及6

4、0d的死亡率比較都明顯降低(p﹤0.05)。兩種模型組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力與假手術(shù)組比較有顯著差異性(p﹤0.01),而兩種模型大鼠組間學(xué)習(xí)記憶功能無顯著性差異(p﹥0.05)。各組大鼠的運動功能比較無明顯差異性(p﹥0.05)。兩種模型組大腦海馬區(qū)及紋狀體均發(fā)生明顯神經(jīng)形態(tài)學(xué)改變。
　　2)改良的2-VO法制備的大鼠慢性大腦灌注不足引起的血管性癡呆模型存活率較高為75％,各組大鼠的運動功能比較無明顯差異性(P﹥0.05)。30d和6

5、0d定位航行試驗顯示模型組大鼠平均逃避潛伏期與假手術(shù)組和正常對照組比較有顯著差異性(P﹤0.01),而迷迭香復(fù)合精油組明顯短于模型組(P<0.01)與依達(dá)拉奉組相比未見顯著差異?？臻g探索試驗中跨越原平臺的次數(shù),模型組大鼠與假手術(shù)組和正常對照組比較有顯著差異性(P﹤0.01),迷迭香復(fù)合精油組明顯多于模型組(P<0.01),與依達(dá)拉奉組相比未見顯著差異。模型組大腦海馬區(qū)及紋狀體發(fā)生明顯的病理形態(tài)學(xué)改變;免疫組化中各組大鼠海馬CA1區(qū)CHA

6、T的灰度值和陽性單位數(shù)比較,模型組與正常組及假手術(shù)組比較有顯著差異性P<0.01,迷迭香復(fù)合精油組和依達(dá)拉奉組與模型組比較有顯著差異性P<0.01,迭香復(fù)合精油組與依達(dá)拉奉組比較無顯著差異性P>O.O5。迷迭香復(fù)合精油組及依達(dá)拉奉組與模型組相比海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞損害較輕,CHAT陽性細(xì)胞表達(dá)明顯增加。
　　結(jié)論:1)改良的2-VO法可以復(fù)制大鼠大腦永久性慢性灌注不足引起的VD模型,引起與記憶有關(guān)的海馬及紋狀體損害,而運動功能未見損害。