低氧誘導(dǎo)下HIF-2α與VE-cadherin在宮頸腺癌中的表達(dá)及其相關(guān)性研究.pdf

1、目的:通過檢測(cè)正常宮頸組織及宮頸腺癌組織中HIF-2μ、VE-cadherin的表達(dá)情況，分析其表達(dá)的相關(guān)性和差異性，從而探討HIF-2α、VE-cadherin的表達(dá)在宮頸腺癌發(fā)生發(fā)展中的意義。
　　方法:1、收集60例人宮頸腺癌組織和18例正常宮頸組織，采用免疫組織化學(xué)法（Envision法）檢測(cè)各組織中HIF-2α、VE-cadherin的表達(dá);2、通過CoCl2試劑造細(xì)胞體外缺氧模型;3、體外培養(yǎng)人宮頸腺癌Hela細(xì)胞，用

2、(50、100、150、200、250μmol/L)不同濃度的CoCl2作用于Hela細(xì)胞不同時(shí)間（0、24、48、72小時(shí)）后，用MTT法檢測(cè)各組中缺氧對(duì)人宮頸腺癌Hela細(xì)胞增殖活性的影響;用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)100μmol/LCoCl2作用0、24、48、72小時(shí)后人宮頸腺癌Hela細(xì)胞中HIF-2α和VE-cadherin在mRNA表達(dá)水平上的變化;用Westernblot技術(shù)檢測(cè)100μmol/LCoCl2作用0、24、48

3、、72小時(shí)后人宮頸腺癌Hela細(xì)胞中HIF-2α和VE-cadherin在蛋白表達(dá)水平上的改變。
　　結(jié)果:1、檢測(cè)60例人宮頸腺癌組織和18例正常宮頸組織后發(fā)現(xiàn)，HIF-2μ在人宮頸腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率為56.67％，在正常宮頸組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為11.11％，二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05); VE-cadherin在宮頸腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為65.00％，在正常宮頸組織的宮頸腺中的陽(yáng)性表達(dá)率為5.56％，二者相比差異

4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。HIF-2α及VE-cadherin的表達(dá)與否與宮頸腺癌患者有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、腫瘤大小有關(guān)(P＜0.05)，與患者的年齡、腫瘤的分化程度無關(guān)(P＞0.05)，而且HIF-2μ與VE-cadherin兩者表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.632(P＜0.05);2、MTT細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果表明，50μmol/L和100μmol/LCoC l2作用24h組Hela細(xì)胞增殖力全都高于對(duì)照組(P＜0.05)

5、，其中100μmol/L時(shí)細(xì)胞增殖力最高;50μmol/L和100μmol/L24h組細(xì)胞增殖力無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;50μmol/L和100μmol/LCoC l2作用48h、72h組，Hela細(xì)胞增殖力全都低于對(duì)照組(P＜0.05);150μmol/L、200μmol/L、250μmol/LCoCl2作用下，Hela細(xì)胞增殖力全都低于對(duì)照組(P＜0.05)。3、RT-PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比在CoCl2濃度為100μmol/L作用下的各

6、時(shí)間組中的HIF-2α和VE-cadherin都有增加，并且VE-cadherin的增加在缺氧48小時(shí)達(dá)到最大值，而HIF-2α卻是一直呈上升趨勢(shì)。HIF-2α和VE-cadherin在mRNA表達(dá)水平上存在正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.987，P=0.013(P＜0.05);4、Western blot結(jié)果表明，與對(duì)照組相比較在100μmol/L CoCl2誘導(dǎo)下，各時(shí)間組的人宮頸腺癌Hela細(xì)胞在缺氧環(huán)境中HIF-2α和VE-cadhe

7、rin蛋白表達(dá)量均升高，且VE-cadherin蛋白表達(dá)量在缺氧48小時(shí)達(dá)到最大，隨之有所減少，而HIF-2α的蛋白表達(dá)量一直呈上升趨勢(shì)。HIF-2α和VE-cadherin在蛋白表達(dá)水平上存在正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.869，P=0.031(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1、HIF-2α與VE-cadherin的蛋白表達(dá)水平的高低可能對(duì)宮頸癌患者腫瘤的轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)有一定預(yù)警作用;2、HIF-2α可能是調(diào)控VE-cadherin表達(dá)的

8、眾多調(diào)控因子之一，HIF-2α可能是通過誘導(dǎo)VE-cadherin在蛋白水平的高表達(dá)來促進(jìn)宮頸腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移;3、缺氧在一定時(shí)間內(nèi)可促進(jìn)宮頸腺癌Hela細(xì)胞的增殖，隨著濃度的增加和時(shí)間的延長(zhǎng)，Hela細(xì)胞增殖將會(huì)受到抑制;4、HIF-2α可能通過誘導(dǎo)人宮頸腺癌Hela細(xì)胞中VE-cadherin的蛋白表達(dá)，減少缺氧對(duì)人宮頸腺癌Hela細(xì)胞增殖的抑制作用;5、HIF-2α抗血管生成劑及抗體在人宮頸腺癌的治療方面可能具有潛在的臨床研究?jī)r(jià)值，