體外共同培養(yǎng)的鼠骨骼肌成肌細胞和心肌細胞間連接的形態(tài)和電生理學(xué)研究.pdf

1、本研究將新生SD大鼠的骨骼肌成肌細胞與心肌細胞在體外共同培養(yǎng)，從形態(tài)學(xué)和電生理學(xué)兩個層面研究二者間連接的性質(zhì)，并對可能的影響因素進行初步分析。整個實驗共分五個部分?！　〉谝徊糠纸⒑线m的骨骼肌成肌細胞與心肌細胞體外共同培養(yǎng)的模型。在含20％胎牛血清DMEM液中，骨骼肌成肌細胞與心肌細胞可共同培養(yǎng)；心肌細胞主要對骨骼肌成肌細胞增殖有促進作用，而對骨骼肌成肌細胞的融合、成熟無促進作用。第二部分探尋共同培養(yǎng)的骨骼肌成肌細胞與心肌細胞間連接的

2、形態(tài)學(xué)證據(jù)。體外共同培養(yǎng)的心肌細胞與骨骼肌成肌細胞間確有形成類似于縫隙連接的物質(zhì)基礎(chǔ)并可形成連接。第三部分明確共同培養(yǎng)的骨骼肌成肌細胞與心肌細胞中連接相關(guān)蛋白Connexin43、Cadherin、NCAM的表達情況。骨骼肌成肌細胞在與心肌細胞共培養(yǎng)后，有一些特性“心肌細胞化”，融合、成熟延遲，Connexin43表達增多，可以與心肌細胞形成縫隙連接。第四部分對影響骨骼肌成肌細胞Connexin43蛋白表達增多的因素進行初步分析。骨骼肌

3、成肌細胞在“心肌環(huán)境”及“共同培養(yǎng)環(huán)境”的培養(yǎng)液中培養(yǎng)主要表現(xiàn)為細胞數(shù)量的增長及分化、成熟的延遲，而Connexin43表達并不增加，表明與心肌細胞的互相接觸是影響骨骼肌成肌細胞分化的重要因素；單純增加電、機械刺激的頻率不能使Connexin43表達增多；心肌細胞對共同培養(yǎng)的骨骼肌成肌細胞分化的影響因素是多因素復(fù)合作用。第五部分分析共同培養(yǎng)的心肌細胞與骨骼肌成肌細胞間的電信號傳導(dǎo)特點以判斷連接的性質(zhì)。證實骨骼肌成肌細胞能與心肌細胞形成共