孵化期雞胚胎死亡及其遺傳影響因素的研究.pdf

1、為了研究整個(gè)孵化期的雞胚胎死亡規(guī)律、雌性和雄性胚胎死亡規(guī)律，以及種蛋品質(zhì)和胚胎發(fā)育相關(guān)基因的變異對(duì)胚胎死亡、雌性和雄性胚胎死亡的影響，本試驗(yàn)以溫氏集團(tuán)培育的黃雞種蛋為研究對(duì)象，探討了種蛋品質(zhì)與種蛋受精、胚胎成活和性別的相關(guān)性；對(duì)與人和小鼠胚胎發(fā)育相關(guān)的維甲酸X受體Q亞型（RXRa）和胰島素樣生長(zhǎng)因子2受體（IGF2R）兩個(gè)基因進(jìn)行了SNP位點(diǎn)的篩選和多態(tài)性檢測(cè)；探討了胚胎發(fā)育相關(guān)基因SNP多態(tài)性及其與胚胎死亡、死亡胚胎性別、種蛋品質(zhì)的相

2、關(guān)性；同時(shí)探討和初步建立用于早期胚胎性別鑒定的分子生物學(xué)方法。主要研究結(jié)果如下： 1．初步建立了用雙重PCR技術(shù)鑒定雞早期胚胎性別的分子生物學(xué)方法，可用于鑒定胚盤(pán)和發(fā)育早期胚胎的性別。 2．探討了胚胎死亡規(guī)律。整個(gè)孵化期胚胎死亡高峰期主要集中在2-6天和17-19天。雄性胚胎在兩個(gè)高峰期的死亡數(shù)高于雌性胚胎。 3．尋找和檢測(cè)了基因SNP。在雞RXRα基因的4個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子中發(fā)現(xiàn)了18個(gè)SNP位點(diǎn)，對(duì)7個(gè)SN

3、P位點(diǎn)進(jìn)行了PCR-RFLP檢測(cè)。IGF2R基因第34外顯子發(fā)現(xiàn)2個(gè)SNP位點(diǎn)，對(duì)1個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行了PCR-RFLP檢測(cè)。 4．分析了胚胎RXRα僅和IGF2R的SNP位點(diǎn)PCR-RFLPs基因型在死亡和正常發(fā)育胚胎中分布特征。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，雞RXRα基因第2外顯子HhaⅠ-RFLP基因型在死亡和正常發(fā)育胚胎中差異極顯著；IGF2R基因第34外顯子AlwNⅠ-RFLP基因型在死亡和正常發(fā)育胚胎中存在顯著差異。 5．分析了

4、胚胎RXRα和IGF2R的SNP位點(diǎn)PCR-RFLPs基因型在雌性和雄性胚胎中分布特征。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，雞RXRa基因第15內(nèi)含子HhaⅠ-RFLP基因型在雌性和雄性胚胎中差異顯著，在死亡雌性胚胎和死亡雄性胚胎中差異極顯著。 6．RXRα基因第2外顯子BstXⅠ-RFLP基因型GG的胚胎的種蛋蛋殼厚度極顯著地高于基因型AA、AG的蛋殼厚度；死亡胚胎中，基因型GG的種蛋蛋殼厚度顯著地高于基因型AA、AG的蛋殼厚度。在第15內(nèi)含子Hha