小型豬心肌缺血模型血瘀證相關(guān)指標(biāo)的動(dòng)態(tài)研究.pdf

1、心肌缺血是由于冠狀動(dòng)脈血流和心肌需求之間不平衡而導(dǎo)致的。臨床顯示：引起心肌缺血最主要、最常見(jiàn)的病因是冠心病。冠心病是危害中老年人健康的常見(jiàn)病，研究發(fā)現(xiàn)從瘀論治冠心病能取得良好療效。故以動(dòng)物模型為手段的冠心病心肌缺血血瘀證基礎(chǔ)研究對(duì)于本病的臨床診治有著舉足輕重的意義。 目的本研究通過(guò)觀察Ameroid縮窄環(huán)制備的小型豬冠心病慢性心肌缺血模型相關(guān)指標(biāo)的變化，探討心肌缺血模型血瘀證相關(guān)指標(biāo)的變化規(guī)律，從而為冠心病血瘀證模型的建立提供新

2、方法，為病證結(jié)合模型的構(gòu)建提供新思路。 方法1.小型豬冠心病心肌缺血模型的建立以中華小型豬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。隨機(jī)分為模型組12只，假手術(shù)組6只。動(dòng)物在麻醉狀態(tài)下，左側(cè)第三肋間開(kāi)胸，于左冠狀動(dòng)脈前降支第一間隔支起始部遠(yuǎn)端，鈍性分離冠狀動(dòng)脈4-6mm，模型組置放縮窄環(huán)，關(guān)胸；假手術(shù)組動(dòng)物手術(shù)過(guò)程同上，但不放置ameroid縮窄環(huán)。術(shù)后常規(guī)喂養(yǎng)8-10周。 模型組和假手術(shù)組，于術(shù)后4-6周，進(jìn)行冠脈造影檢測(cè)；于術(shù)前，術(shù)后4-6周及術(shù)

3、后8-10周行超聲心動(dòng)圖檢測(cè)。超聲心動(dòng)圖采用動(dòng)態(tài)圖像觀測(cè)與瞬時(shí)停禎結(jié)合的方法，檢查二維，M型及多普勒超聲心動(dòng)圖，獲取胸骨旁左室長(zhǎng)軸、二尖瓣、乳頭肌、心尖部3個(gè)水平的胸骨旁左室短軸切面及心尖兩腔，四腔切面。采用左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDd)，左室收縮末期內(nèi)徑(LVEDs)，室間隔厚度，左室前壁厚度(二尖瓣、乳頭肌、心尖部3個(gè)水平)，舒張末期容積(EDV)，收縮末期容積(ESV)，二尖瓣E峰，A峰等指標(biāo)，并計(jì)算出射血分?jǐn)?shù)(EF)值及短軸縮短

4、率(FS)，每搏輸出量(SV)，左室前壁收縮期的室壁增厚率。結(jié)果用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件處理。同時(shí)，應(yīng)用二維超聲，目測(cè)分析評(píng)價(jià)左室肌形態(tài)及運(yùn)動(dòng)。 2.小型豬心肌缺血模型血瘀證相關(guān)指標(biāo)的采集、觀測(cè)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，動(dòng)態(tài)觀察動(dòng)物模型的行為改變及一般情況，其中，舌象觀察方法為：數(shù)碼相機(jī)拍攝舌象加比色卡照片，Adobephotoshop8.0對(duì)其進(jìn)行分析。 術(shù)前及術(shù)后各周，檢測(cè)小型豬血液流變學(xué)指標(biāo)，并采用放免法檢測(cè)血血栓素B2(TXB2)

5、、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)、內(nèi)皮素(ET)、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)含量。結(jié)果采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。 結(jié)果1.冠脈造影術(shù)后4-6周，冠脈造影顯示，模型組50％動(dòng)物左冠脈前降支完全閉塞；33％動(dòng)物左冠脈前降支狹窄＞80％。假手術(shù)組無(wú)明顯異常。 2.超聲心動(dòng)圖與術(shù)前相比。模型組動(dòng)物，術(shù)后4-6周，LVEDd增加，P＜0.05；術(shù)后8-10周，左室前壁厚度在收縮末期的乳頭肌水平，舒張末期的

6、心尖水平均明顯減小，P＜0.05；術(shù)后4-6周，8-10周，左室前壁在心尖水平收縮末期的厚度均顯著降低，P＜0.01；在心尖水平，左室前壁收縮期室壁增厚率術(shù)后顯著降低，與術(shù)前相比，術(shù)后4-6周，8-10周，均P＜0.01，且比同期二尖瓣水平的增厚率明顯降低，P＜0.05。術(shù)后4-6周，EDV明顯升高，P＜0.05，并于術(shù)后8-10周，繼續(xù)升高，P＜0.05；術(shù)后4-6周，二尖瓣頻譜E峰升高，P＜0.05。 與假手術(shù)組同期相比。術(shù)

7、后4-6周，模型組LVEDd、EDV均顯著升高，P＜0.05；術(shù)后4-6周，心尖水平左室前壁厚度及前間隔舒張末期厚度，均顯著降低，P＜0.05。 二維超聲目測(cè)分析評(píng)價(jià)左室肌形態(tài)及運(yùn)動(dòng)結(jié)果：術(shù)后4-6周，5只動(dòng)物出現(xiàn)心尖部室壁變薄，運(yùn)動(dòng)減弱；3只出現(xiàn)心尖膨出，分別占存活動(dòng)物的83％及50％。術(shù)后8-10周，全部出現(xiàn)，心尖部室壁變薄，心尖膨出；心肌階段性運(yùn)動(dòng)消失；其中1只左室前壁心肌運(yùn)動(dòng)減弱，心腔擴(kuò)大。 3.動(dòng)物一般行為指標(biāo)

8、模型動(dòng)物在復(fù)制過(guò)程中觀察到：造模的第1周，動(dòng)物精神不振，喜臥懶動(dòng)，行動(dòng)緩慢；采食、飲水量少；鼻黏膜蒼白。第2周，動(dòng)物精神正常，活動(dòng)自如；采食、飲水量增加。第3-6周，動(dòng)物出現(xiàn)精神緊張、易激惹，怕人，不易接近，沖撞籠欄；被毛雜亂、無(wú)光澤；耳溫涼；糞便干燥等表現(xiàn)。造模6周后，動(dòng)物精神逐漸恢復(fù)正常，可接近人，步態(tài)正常。假手術(shù)組動(dòng)物，造模第1、2周，表現(xiàn)同手術(shù)組，3周后，精神逐漸恢復(fù)正常；采食、飲水量增加，被毛整齊，有光澤。 4.舌象術(shù)

9、前，所有動(dòng)物舌色為淡紅、淡白，舌體可見(jiàn)裂紋，濕滑，舌苔薄。術(shù)后3-6周，模型組動(dòng)物舌色逐步呈蒼白、暗紅、青紫色，舌體有裂紋，且濕滑，舌苔膩。假手術(shù)組動(dòng)物舌象未觀察到明顯變化。 Adobephotoshop8.0分析舌象，結(jié)果顯示，R比術(shù)后明顯下降，與術(shù)前相比，術(shù)后3、4、6、7、8各周均P＜0.01，術(shù)后5周P＜0.05，與同期假手術(shù)組相比，術(shù)后6周，P＜0.05。術(shù)后B比，G比顯著升高，與術(shù)前相比，B比，術(shù)后3-8各周均P＜0

10、.01，G比，術(shù)后3、6、7周P＜0.05，與同期假手術(shù)組相比，B比，術(shù)后3周，P＜0.05，術(shù)后6周，P＜0.01。 5.血液流變學(xué)：本研究發(fā)現(xiàn)：術(shù)后1、3、4、6周全血粘度150/s、38/s均顯著升高，全血粘度150/s與術(shù)前相比，術(shù)后3、4周P＜0.01，術(shù)后1、6周P＜0.05；全血粘度38/s與術(shù)前相比，術(shù)后1、4周P＜0.01，術(shù)后3、6周P＜0.05；與術(shù)前相比，術(shù)后1周，全血粘度10/s，全血粘度5/s顯著升高

11、，P＜0.05；壓積測(cè)定值術(shù)后顯著升高，與術(shù)前相比，術(shù)后3-7各周，P＜0.05，與同期假手術(shù)組相比，術(shù)后3周，P＜0.05，術(shù)后4周，P＜0.01；聚集指數(shù)積分面積術(shù)后明顯升高，與術(shù)前相比，術(shù)后3、6周，均存在顯著差異(P＜0.05)；術(shù)后3周變形指數(shù)及變形指數(shù)積分面積顯著減小，變形指數(shù)與術(shù)前相比，變形指數(shù)積分面積與術(shù)前及假手術(shù)組相比，均差異顯著(P＜0.05)。 假手組動(dòng)物，全血粘度術(shù)后顯著降低，與術(shù)前相比，切變率為38/s

12、時(shí)，術(shù)后5周，切變率為10/s、5/s時(shí)，術(shù)后2-5周，均存在顯著差異(P＜0.05)，還原粘度38/s、10/s、5/s術(shù)后顯著降低，術(shù)后3周，分別與自身術(shù)前相比，均P＜0.05。 6.TXB2、6-Keto-PGF1α小型豬術(shù)后TXB2水平顯著升高，術(shù)后1、3、5、6、7、8各周與術(shù)前相比，均P＜0.05，術(shù)后3、5周，與同期假手術(shù)組相比，P＜0.05；而6-Keto-PGF1α水平明顯降低，與術(shù)前相比，術(shù)后2、3、5、6、

13、7、8各周均P＜0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；TXB2與6-Keto-PGF1α的比值術(shù)后逐漸增高，術(shù)后3、5、6、7、8周，與術(shù)前相比，差異顯著，P＜0.05。假手術(shù)組血TXB2水平，術(shù)后1-2周升高，之后顯著減低，術(shù)后5周，與術(shù)后1周相比，存在顯著差異(P＜0.05)。 7.ET、CGRP小型豬術(shù)后ET水平升高，術(shù)后3周，與術(shù)前相比，P＜0.05，與同期假手術(shù)組相比，P＜0.01；而CGRP水平，術(shù)后有降低趨勢(shì)，但與術(shù)前相比，無(wú)統(tǒng)

14、計(jì)學(xué)意義；ET與CGRP的比值術(shù)后逐漸增高，術(shù)后3周，與術(shù)前相比，差異顯著(P＜0.05)。假手術(shù)組血ET水平，術(shù)后1-2周升高，之后顯著減低，術(shù)后3、4周，與術(shù)后2周相比，均存在顯著差異(P＜0.05)。 結(jié)論1.通過(guò)冠脈造影，超聲心動(dòng)圖檢查結(jié)果證明：采用中華實(shí)驗(yàn)小型豬，左冠狀動(dòng)脈前降支放置Ameroid收縮環(huán)，可獲得良好的冠心病慢性心肌缺血模型。本模型可用于冠心病慢性心肌缺血及其相關(guān)疾病的進(jìn)一步研究。 2.用Amer