九節(jié)龍皂苷Ⅰ誘導(dǎo)口腔粘液表皮樣癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Mc3凋亡作用的研究.pdf

1、目的：
　　研究九節(jié)龍皂苷Ⅰ(ardipusilloside I,ADS I)對口腔粘液表皮樣癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株Mc3的增殖、凋亡及細(xì)胞周期的影響,初步探討ADSI可能的抗腫瘤作用機制。
　　方法：
　　以不同濃度的ADSI作用于口腔粘液表皮樣癌Mc3細(xì)胞，采用MTT法觀察ADSI對口腔粘液表皮樣癌Mc3細(xì)胞增殖的影響；采用Hoechest33342染色法和透射電鏡（TEM）觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化；采用AnnexinV/PI

2、雙染色法檢測細(xì)胞凋亡情況；采用流式細(xì)胞術(shù)PI單色標(biāo)記法檢測Mc3細(xì)胞周期的改變；采用DNA瓊脂糖凝膠電泳法檢測凋亡特異性梯狀DNA；采用免疫組化法檢測抗凋亡蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白caspase-3表達(dá)的變化。
　　結(jié)果：
　　ADSI作用于Mc3細(xì)胞后,小劑量對細(xì)胞殺傷作用較輕,隨著藥物濃度的增加,ADSI能顯著抑制Mc3細(xì)胞增殖而且呈明顯的濃度、時間依賴關(guān)系，作用于Mc3細(xì)胞48h的IC50值為9.98ug/ml。Ho

3、echest33342染色法和透射電鏡觀察到細(xì)胞形態(tài)學(xué)上的變化，包括細(xì)胞皺縮，微絨毛消失，染色質(zhì)固縮集聚至核膜周邊呈新月形。流式細(xì)胞儀檢測未經(jīng)藥物作用的細(xì)胞凋亡率為11.63±0.16％，2.5、5、10ug/mlADSI作用24后的凋亡率為15.57±0.07％，25.63±0.18％，86.27±0.04％；細(xì)胞周期阻滯在S期；瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示，10ug/mlADSI作用于Mc3細(xì)胞24后，可見凋亡細(xì)胞典型的梯狀DNA條帶，W