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文檔簡介
1、片形吸蟲病(Fasciolasis)是由肝片吸蟲和大片吸蟲感染引起的人畜共患寄生蟲病,呈世界性分布。由于片形吸蟲病發(fā)病緩慢,易于傳播,至今沒有一種有效果的預(yù)防措施,嚴(yán)重威脅牧區(qū)人民的健康和畜牧業(yè)發(fā)展。因此,對片形吸蟲病的早期診斷和免疫預(yù)防也就成為了當(dāng)前的研究熱點。
本研究通過生物信息學(xué)分析大片吸蟲硫氧還蛋白過氧化物酶(Fg.TPx)的基因序列及其編碼的氨基酸序列的特性,設(shè)計引物,擴增出Fg.TPx基因,構(gòu)建原核重組質(zhì)粒,利
2、用大場桿菌表達(dá)載體進(jìn)行表達(dá)和鑒定。結(jié)果顯示PCR擴增得到目的基因的長度為654bp,該基因與互聯(lián)網(wǎng)檢索的基因序列同源性為98%,氨基酸序列同源性為99%,表達(dá)并純化出Fg.TPx,分子量約48KDa。用純化的重組蛋白Fg.TPx作為抗原免疫家兔制備抗血清,通過ELISA及Western blot對重組蛋白。Fg.TPx的免疫學(xué)特性進(jìn)行初步研究。結(jié)果表明重組蛋白具有大片吸蟲天然TPx蛋白的免疫活性,保持了天然TPx的生物學(xué)功能表位,有望成
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