Ku80蛋白在人體肺腺癌細(xì)胞A549放療前后變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景：國(guó)內(nèi)外研究表明，Ku80蛋白作為DNA修復(fù)蛋白，在雙鏈DNA斷裂(DNAdouble—strand breaks，DSBs)的非同源末端結(jié)合(nonhomologous end joining，NHEJ)修復(fù)途徑中發(fā)揮重要作用。此外，Ku80蛋白在維持端粒結(jié)構(gòu)等其他方面也有著重要作用，Ku80蛋白的缺失和活性的改變與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。由于Ku80蛋白在輻射誘導(dǎo)的DSBs修復(fù)中起到核心作用，其功能的喪失必然導(dǎo)致細(xì)胞損傷修復(fù)

2、能力的降低，這就意味著腫瘤細(xì)胞對(duì)電離輻射的敏感性增高，這一推斷已經(jīng)得到了越來(lái)越多體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)的證實(shí)，更多的研究表明其極有可能作為一個(gè)放射增敏治療的新靶點(diǎn)。 本項(xiàng)研究把人體肺腺癌細(xì)胞接種裸鼠，進(jìn)行射線照射后，測(cè)定放療前后Ku80蛋白表達(dá)的含量與腫瘤的放射敏感性進(jìn)行相關(guān)性分析，探求Ku80蛋白表達(dá)在放射損傷修復(fù)中的作用，為調(diào)控肺腺癌細(xì)胞Ku80蛋白的表達(dá)，進(jìn)而進(jìn)行靶向治療而提供了初步的基礎(chǔ)。 因此，通過(guò)對(duì)Ku80蛋白在人體肺腺

3、癌細(xì)胞中的表達(dá)水平與放療前后變化的研究，將使我們對(duì)Ku80蛋白作用認(rèn)識(shí)更加深入，并可以根據(jù)腫瘤病理Ku80蛋白表達(dá)的程度，從放射損傷修復(fù)的角度，預(yù)測(cè)肺癌的放射敏感性，對(duì)提高肺癌放療的反應(yīng)率，延長(zhǎng)病人的生存期具有很大意義。 研究目的：通過(guò)將人體肺腺癌A549細(xì)胞接種裸鼠，長(zhǎng)成癌瘤后，進(jìn)行不同強(qiáng)度的射線照射，測(cè)定放療前后Ku80蛋白表達(dá)的含量與腫瘤的放射的強(qiáng)度、時(shí)間進(jìn)行相關(guān)性分析，以探求Ku80蛋白表達(dá)在放射損傷修復(fù)中的作用。

4、 研究方法：本研究將人體肺腺癌A549細(xì)胞接種裸鼠皮下，形成癌瘤后進(jìn)行射線照射，測(cè)定放療前后Ku80蛋白表達(dá)的含量與腫瘤的放射的強(qiáng)度、時(shí)間進(jìn)行相關(guān)性分析。培養(yǎng)人體肺腺癌細(xì)胞后皮下接種30只雌性4周裸鼠(射線照射組24只，對(duì)照組6只)，長(zhǎng)成癌瘤后以8Gy、12Gy的強(qiáng)度分別進(jìn)行射線照射，用免疫組化的方法測(cè)定接種的A549細(xì)胞癌瘤照射后24小時(shí)、48小時(shí)Ku80蛋白表達(dá)的含量，并通過(guò)圖像分析系統(tǒng)測(cè)定平均光密度和陽(yáng)性面積率，進(jìn)行相關(guān)性分析。

5、 研究結(jié)果： ①射線照射后24小時(shí)8Gy、12Gy兩組裸鼠接種的A549細(xì)胞癌瘤Ku80蛋白表達(dá)較對(duì)照組均顯著上升，且以12Gy強(qiáng)度照射后24小時(shí)Ku80蛋白表達(dá)更為明顯； ②8Gy、12Gy照射后48小時(shí)兩組裸鼠A549細(xì)胞癌瘤Ku80蛋白表達(dá)量較同樣強(qiáng)度射線照射后24小時(shí)增加。 結(jié)論： 人體肺腺癌細(xì)胞A549的Ku80蛋白表達(dá)隨著放射強(qiáng)度的增加而增加，同時(shí)在一定的時(shí)間范圍內(nèi)隨著照射后時(shí)間的延長(zhǎng)