生姜醇提取物對人體肺腺癌細(xì)胞(A549)增殖和凋亡的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：研究生姜醇提取物（Zingiber officinale）對人肺腺癌細(xì)胞（A549）（Human Adenocarcinoma549）增殖和凋亡變化的影響，并探討生姜醇提取物抑制A549細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)凋亡發(fā)生的機(jī)制。 方法：本研究實(shí)驗(yàn)組用濃度為10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L生姜醇提取物分別處理A549細(xì)胞24h，對照組為未經(jīng)生姜醇提取物處理A549細(xì)胞。1.MTT比色法檢測A549細(xì)胞增殖能力；2.光

2、鏡觀察細(xì)胞的生長情況、形態(tài)學(xué)改變；3.原位末端TdT酶標(biāo)記技術(shù)（TUNNEL）檢測細(xì)胞凋亡的情況；4.免疫細(xì)胞化學(xué)法（SP）檢測細(xì)胞Cytochrome C（Cyt C）蛋白表達(dá)；5.流式細(xì)胞儀法檢測羅丹明123染色后細(xì)胞熒光強(qiáng)度以確定線粒體膜電位變化；6.流式細(xì)胞儀法檢測細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果：1.MTT比色法結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組抑制率分別為14.87％、24.72％、38.21％，與對照組（0.04％）比較抑制率明顯增加，均有極顯著

3、差異（P<0.01）；并隨生姜醇提取物濃度增高而明顯增加，各實(shí)驗(yàn)組之間的兩兩比較也有極顯著差異（p<0.01）；2.光鏡觀察對照組細(xì)胞生長正常，凋亡細(xì)胞少見，而實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長疏散，凋亡細(xì)胞的比例增加，程度隨生姜醇提取物濃度增高而加重，尤以40μmol/L作用24h最明顯；3.TUNNEL檢測凋亡細(xì)胞指數(shù)實(shí)驗(yàn)組分別為9.36％±0.82％、13.74％±1.15％、19.17％±1.4％，與對照組（4.81±0.36％）比較，均有極顯著差

4、異（p<0.01）；并隨生姜醇提取物濃度增高而明顯增加，各實(shí)驗(yàn)組之間的兩兩比較也有極顯著差異（p<0.01）；4.免疫細(xì)胞化學(xué)法（SP）檢測細(xì)胞Cyt C蛋白表達(dá)水平實(shí)驗(yàn)組分別為0.23±0.03、0.27±0.06、0.32±0.07，與對照組（0.15±0.02）比較均有顯著差異（p<0.05）；5.流式細(xì)胞儀法檢測羅丹明123染色后細(xì)胞線粒體平均熒光強(qiáng)度實(shí)驗(yàn)組分別為24.78±3.88、36.47±5.74、47.89±6.92，

5、與對照組（16.41±2.32）比較均有極顯著差異（p<0.01）；6.流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率實(shí)驗(yàn)組分別為9.87％±1.86％、12.54％±2.12％、18.39％±1.98％，與對照組（0.17±0.03％）比較，均有極顯著差異（p<0.01）。 結(jié)論：1.生姜醇提取物能抑制人肺腺癌細(xì)胞的增殖，其作用呈明顯劑量依賴性，即隨劑量的增加而抑制率增加。 2.生姜醇提取物可明顯降低人肺腺癌細(xì)胞線粒體膜電位。免疫細(xì)胞化學(xué)分