A771726的臨床前大鼠藥代動力學(xué)研究.pdf

1、A771726是免疫調(diào)節(jié)藥來氟米特 (leftunomide，LEF)在機(jī)體內(nèi)的活性代謝物，后者在臨床上主要用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、抗移植排斥反應(yīng)和銀屑病。A771726是原形藥物，將其制成口服制劑在體內(nèi)直接吸收起作用，省略了前體藥物轉(zhuǎn)化的環(huán)節(jié)，目前正在申報一類新藥。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察A771726在大鼠體內(nèi)的吸收、血漿蛋白結(jié)合、分布、排泄特點(diǎn)，并與來氟米特的相關(guān)藥動學(xué)參數(shù)進(jìn)行比較，進(jìn)行合理評價，提供新藥臨床前研究資料，以支

2、持人體藥代動力學(xué)研究并為臨床用藥提供參考依據(jù)。 1.生物樣品中A771726分析方法的建立 本文采用沉淀蛋白處理血漿樣品和液液萃取處理生物樣品，建立A771726的HPLC分析方法。色譜分離條件為：色譜柱：Kromasil ODS C<,18>(150×4.6mm)；流動相為0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(pH4.5)和甲醇(43：57)；檢測波長288nm；柱溫：30℃。采用本文建立的生物樣品預(yù)處理方法和反相高效液相色

3、譜法分離測定生物樣品中A771726的含量，生物樣品預(yù)處理方法回收率高，色譜分離選擇性好。本法的準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度、專屬性和定量線性范圍均達(dá)到了體內(nèi)藥物分析的要求。該方法成功運(yùn)用于A771726的大鼠藥代動力學(xué)研究。 2.A771726在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究 SD大鼠單次口服給藥(3、6、12mg/kg)后不同時間點(diǎn)取血，用上述建立的HPLC法測定血漿中A771726的濃度，根據(jù)所得的血漿藥物濃度一時間曲線，計算

4、藥動學(xué)參數(shù)，T<,1/2Ke> (h)：16.71±2.34、14.69±1.94、16.4.5±2.49；AUC<,(0-tn)>(mg/L·h)：271.38±78.87、785.57±170.92、994.13±165.43；C<,max>(mg/L)：11.42±2.59、29.38±5.41、42.10±5.73；T<,max>(h)：4.00±0.82、4.10±0.74、4.20±1.03；MRT<,(0-tn)>(h)：

5、22.07±1.80、21.91±1.60、20.71±1.88。單劑量口服A771726三個劑量組的藥物吸收均成線性關(guān)系，其血藥濃度－時間曲線符合一級吸收的一房室模型。 3.A771726的血漿蛋白結(jié)合率研究 血漿中加入A771726使最終濃度分別達(dá)到3，6，12μg/ml，每份加藥血漿樣品用平衡透析法在4℃條件下透析108h，透析結(jié)束后，用HPLC法分別測定血漿及緩沖液樣品中的藥物濃度，計算藥物的血漿蛋白結(jié)合率，結(jié)果

6、表明在上述范圍內(nèi)A771726與人的血漿蛋白結(jié)合率約97.7％，無濃度依賴性。 4.A771726在大鼠體內(nèi)的組織分布研究 SD大鼠口服給藥A771726 (6mg/kg)后，分別于給藥后2h、12h、24h股動脈放血處死，立即取出各臟器組織，濾紙吸干浮血，稱重后用生理鹽水制成勻漿，取勻漿液處理，用HPLC法測定各組織中藥物濃度。結(jié)果顯示，給藥后A771726分布于主要組織，各臟器組織中的藥物含量均低于血漿，肝腎組織中A

7、771726濃度較高，大多數(shù)組織在12h達(dá)高峰，腦、骨髓、胸腺、睪丸中含量較低。 5.A771726在大鼠體內(nèi)的排泄研究 SD大鼠口服給藥A771726(6mg/kg)后收集膽汁、糞便、尿液樣品，記錄體積和重量，用HPLC法分析樣品中A771726的濃度，將膽汁、糞便、尿液中的藥物濃度乘以相應(yīng)的膽汁排泄量、糞便量、尿量，并累加求和，計算藥物的累積排泄量。結(jié)果顯示大鼠單次灌胃給藥后，糞便的排泄結(jié)果顯示，0～48h排泄量占總