LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白在基底細(xì)胞樣乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、乳腺癌占女性全部惡性腫瘤的22％，是女性最常見的惡性腫瘤之一。女性患乳腺癌的危險(xiǎn)隨著生育年齡、生育數(shù)量以及飲食結(jié)構(gòu)等因素的改變而開始增加，在發(fā)展中國家，這一現(xiàn)象更為突出。自上世紀(jì)70年代末開始，乳腺癌就一直是我國女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤，并且發(fā)病率呈快速上升趨勢，并且發(fā)病年齡越來越年輕化，對女性的健康和生命構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅。近年來，雖然隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，乳腺癌的死亡率明顯下降，但復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移性乳腺癌仍然是臨床醫(yī)生面對的最大難題。

2、　　根據(jù)cDNA組織芯片基因表型將乳腺癌分為5種亞型。其中一種，的臨床表現(xiàn)、病理組織學(xué)及免疫表型均頗具特征，并且具有最高的增殖指數(shù)和較差的臨床預(yù)后，易早期發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和術(shù)后局部復(fù)發(fā)，約占全部乳腺癌的15％～25％，將其命名為基底細(xì)胞樣乳腺癌(basal-like breastcarcinoma，BLBC)。多數(shù)乳腺癌患者采用術(shù)后內(nèi)分泌治療，因?yàn)榛准?xì)胞樣乳腺癌中激素受體HER2、ER、PR三聯(lián)陰性表達(dá)，且該類乳腺癌多伴有P53基因突變，

3、因此對赫賽汀(Herceptin)靶向治療和內(nèi)分泌治療無效。
　　上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)是一個上皮細(xì)胞向間質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化的過程，細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的變化使上皮細(xì)胞間連接的重要成分缺失，間質(zhì)細(xì)胞特有蛋白激活，從而促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移。
　　賴氨酰氧化酶樣蛋白2(lysyl oxidase-like protein2，LOXL2)是賴氨酰氧化酶(lysyl oxidase

4、，LOX)家族中的一種依賴銅的分泌型胺氧化酶，能夠催化細(xì)胞外基質(zhì)中的膠原纖維與彈性纖維中的賴氨酸殘基交聯(lián)，維持細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)的完整性。研究發(fā)現(xiàn)LOXL2在細(xì)胞衰老、細(xì)胞運(yùn)動、分化及腫瘤發(fā)生、發(fā)展等生物學(xué)功能方面起重要作用。
　　鈣粘附蛋白(cadherin)是一類主要介導(dǎo)細(xì)胞間粘附的鈣依賴性跨膜蛋白，由主要分布于神經(jīng)和肌肉組織中的N-cadherin、分布于胎盤組織中的P-cadherin和分布于上皮組織中的E-cadherin組

5、成。大量研究結(jié)果證實(shí)，在肺癌、腸癌、胃癌、卵巢癌、肝癌等多種腫瘤中，腫瘤的分化、侵襲和轉(zhuǎn)移與E-cadherin表達(dá)的缺失具有顯著相關(guān)性。
　　Vimentin是一種重要的細(xì)胞骨架蛋白，廣泛表達(dá)于間質(zhì)細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等。Vimentin除了維持細(xì)胞完整性以外，還具有影響細(xì)胞粘附和遷移、參與細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡及調(diào)節(jié)基因組DNA表達(dá)的作用。正常上皮細(xì)胞不表達(dá)vimentin，但是在細(xì)胞惡變的情況下，可能表達(dá)于一些上

6、皮源性的細(xì)胞，尤其是上皮源性腫瘤細(xì)胞。
　　目的:探討LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白在基底細(xì)胞樣乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義，探索BLBC的發(fā)生原因、發(fā)展過程及臨床預(yù)后，探尋基底細(xì)胞樣乳腺癌新的治療靶點(diǎn)。
　　方法:采用免疫組織化學(xué)的方法檢測LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白分別在66例癌旁正常乳腺組織、70例非基底細(xì)胞樣乳腺癌及66例基底細(xì)胞樣乳腺癌中的表達(dá)情況，分析其與BLBC臨床

7、病理特征的關(guān)系;分析各因子之間的相互關(guān)系，探尋LOXL2、E-cadherin、vimentin蛋白與基底細(xì)胞樣乳腺癌之間的關(guān)系。免疫組化結(jié)果錄入電腦，采用軟件SPSS18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，正常乳腺組織組、非BLBC組、BLBC組中的各項(xiàng)指標(biāo)陽性率的組間比較、BLBC組中LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白的表達(dá)與各臨床病理特征之間的關(guān)系均采用x2檢驗(yàn)，LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白表達(dá)的相關(guān)分

8、析采用spearman等級相關(guān)分析，采用α=0.05為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)、P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1 LOXL2的表達(dá)情況
　　LOXL2蛋白在正常乳腺組織、NON-BLBC組和BLBC組中的陽性表達(dá)率分別為21.2％(14/66)、51.4％(36/70)和74.2％(49/66)。LOXL2蛋白的陽性表達(dá)率在BLBC組和NON-BLBC組明顯高于癌旁正常乳腺組織組(P＜0.05)，并且LOXL2在

9、BLBC組的陽性表達(dá)率也顯著高于NON-BLBC組（P＜0.05）。LOXL2蛋白在BLBC組中的表達(dá)與患者年齡及腫瘤大小無關(guān)（P＞0.05），而與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān)（P＜0.05）。
　　2 E-cadherin蛋白的表達(dá)情況
　　E-cadherin蛋白在BLBC、NON-BLBC及癌旁正常乳腺組織中的陽性表達(dá)率分別為24.2％(16/66)、41.4％(29/70)和71.2％(47/66)。BLBC組

10、和NON-BLBC組E-cadherin蛋白的陽性表達(dá)率明顯低于正常乳腺組織組(P＜0.05)，并且E-cadherin在BLBC組的陽性表達(dá)率也顯著低于NON-BLBC組(P＜0.05)。E-cadherin蛋白在BLBC組中的表達(dá)與患者年齡及腫瘤大小無關(guān)(P＞0.05)，而與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān)(P＜0.05)。
　　3 Vimentin蛋白的表達(dá)情況
　　Vimentin蛋白在BLBC、NON-BLBC及

11、癌旁正常乳腺組織中的陽性表達(dá)率分別為60.6％(40/66)、42.9％(30/70)和16.7％(11/66)。BLBC組和NON-BLBC組vimentin蛋白的陽性表達(dá)率明顯高于正常乳腺組織組(P＜0.05)，并且vimentin蛋白在BLBC組的陽性表達(dá)率也顯著高于NON-BLBC組(P＜0.05)。vimentin蛋白在BLBC組中的表達(dá)與患者年齡及腫瘤大小無關(guān)(P＞0.05)，而與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān)(P＜0.

12、05)。
　　4 LOXL2、E-cadherin及vimentin蛋白表達(dá)相關(guān)性分析
　　4.1 LOXL2與E-cadherin的相關(guān)性分析
　　在LOXL2陽性表達(dá)的49例BLBC中有6例E-cadherin陽性表達(dá);而LOXL2陰性表達(dá)的17例中有10例呈E-cadherin陽性表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明，LOXL2與E-cadherin蛋白在BLBC中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.475，P＜0.01)。

13、>　　4.2 LOXL2與vimentin的相關(guān)性分析
　　BLBC中LOXL2呈陽性表達(dá)的49例中，vimentin的陽性表達(dá)率為71.42％(35/49)，而LOXL2呈陰性表達(dá)的17例中，vimentin的陽性表達(dá)率為29.41％(5/17)。LOXL2與vimentin蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.376，P＜0.01）。
　　4.3 E-cadherin與vimentin的相關(guān)性分析
　　在E-cadher

14、in陽性的16例BLBC中有11例呈vimentin陽性表達(dá)，E-cadherin呈陰性表達(dá)的50例中有29例呈vimentin陽性表達(dá)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果表明，E-cadherin與vimentin蛋白在BLBC中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.506，P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1 LOXL2蛋白在BLBC組中的表達(dá)明顯高于非BLBC組和正常乳腺組織組，且在非BLBC組中的表達(dá)亦高于正常乳腺組織組，提示LOXL2可能是參

15、與BLBC的發(fā)生、發(fā)展的重要分子;LOXL2蛋白的表達(dá)與基底細(xì)胞樣乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期密切相關(guān)，而與年齡及腫塊大小無關(guān)，說明LOXL2可以促進(jìn)BLBC的浸潤和轉(zhuǎn)移;
　　2 BLBC中E-cadherin的陽性表達(dá)率明顯低于癌旁正常乳腺組織及NON-BLBC，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且E-cadherin的表達(dá)與BLBC的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期密切相關(guān)，提示BLBC的發(fā)生與E-cadherin的表達(dá)下調(diào)密切相關(guān);且在