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1、目的:注射用貞芪扶正是由黃芪、女貞子等中藥組成的凍干粉針劑,是由河北醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院自行研制的一種新型劑型。本實(shí)驗(yàn)旨在探討該藥對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用以及對(duì)化療和放療的增效減毒作用。 方法:1注射用貞芪扶正的抗瘤增效作用; 1.1 注射用貞芪扶正對(duì)荷H<,22>瘤小鼠放療的增效作用:取小鼠100只,雌雄各半,體重18-22g,在無菌條件下,取生長(zhǎng)7天的荷H<,22>瘤小鼠腹水,用3倍體積生理鹽水稀釋,取0.2ml細(xì)胞懸液注
2、射于小鼠腋窩皮下,于接種次日,按體重隨機(jī)分為10組,每組10只。其中5組經(jīng)<'60>Co射線3.5GY/分照射3.5分,然后給藥,放射對(duì)照組腹腔注射生理鹽水,給藥組分別腹腔注射注射用貞芪扶正1.5g、3g和6g/kg,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給貞芪扶正膠囊3g/kg。另5組不經(jīng)照射,分組及給藥方法同上,容積均0.2ml/10g體重,每天1次連續(xù)7天。于末次給藥次日,剝?nèi)×鼋M織,稱重,取每組瘤重平均值,計(jì)算各給藥組抑瘤率。 1.2 注射用貞
3、芪扶正對(duì)荷H<,22>瘤小鼠化療的增效作用:取小鼠100只,雌雄各半,體重18-22g,在無菌條件下,取生長(zhǎng)7天的荷H<,22>瘤小鼠腹水,用3倍體積生理鹽水稀釋,取0.2ml細(xì)胞懸液注射于小鼠腋窩皮下,于接種次日,按體重隨機(jī)分為10組,每組10只。其中陰性對(duì)照組腹腔注射生理鹽水,給藥組分別腹腔注射注射用貞芪扶正1.5g、3g和6g/kg,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給貞芪扶正膠囊3g/kg。環(huán)磷酰胺對(duì)照組皮下注射環(huán)磷酰胺(8mg/kg),合用藥物組
4、在皮下注射環(huán)磷酰胺(8mg/kg)的同時(shí)腹腔注射注射用貞芪扶正1.5g、3g和6g/kg及灌胃貞芪扶正膠囊3g/kg,以上給藥容積均為0.2ml/10g體重,每天1次連續(xù)7天。于末次給藥次日,剝?nèi)×鼋M織,稱重,計(jì)算各給藥組抑瘤率。 2 注射用貞芪扶正的減毒作用; 2.1 注射用貞芪扶正對(duì)放射線照射的減毒作用:取小鼠70只,雌雄各半,體重18-22g,取其中60只小鼠經(jīng)<'60>Co射線7.5GY/分照射1.5分,然后按體
5、重隨機(jī)分為6組,每組10只,另10只不經(jīng)<'60>Co照射,作為正常對(duì)照組。放射對(duì)照組和正常對(duì)照組腹腔注射生理鹽水,給藥組分別腹腔注射注射用貞芪扶正1.5g、3g和6g/kg,貞芪扶正膠囊組按3g/kg灌胃給藥,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給地榆升白片0.2g/kg。給藥容積均0.2ml/10g體重,每天1次連續(xù)7天。于末次給藥次日,小鼠眼眶取血,用全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)白細(xì)胞。取血后處死小鼠,剖取脾臟和胸腺,計(jì)算臟器指數(shù),比較給藥組與對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)
6、差異的顯著性。 2.2 注射用貞芪扶正對(duì)化療的減毒作用:取小鼠70只,雌雄各半,體重18-22g,正常對(duì)照組腹腔注射生理鹽水,其余6組于第1、3、5天皮下注射環(huán)磷酰胺30mg/kg,給藥組每天分別腹腔注射注射用貞芪扶正1.5g、3g和6g/kg,及灌胃貞芪扶正膠囊3g/kg,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃給地榆升白片0.2g/kg,環(huán)磷酰胺對(duì)照組腹腔注射生理鹽水。給藥容積均0.2ml/10g體重,每天1次連續(xù)7天。于末次給藥次日,小鼠眼眶取血,
7、用全自動(dòng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)白細(xì)胞。取血后處死小鼠,剖取脾臟和胸腺,計(jì)算臟器指數(shù),比較給藥組與對(duì)照組各項(xiàng)指標(biāo)差異的顯著性。 3 注射用貞芪扶正對(duì)小鼠免疫功能的影響; 3.1 注射用貞芪扶正對(duì)小鼠體液免疫的影響(血清溶血素法):取小鼠60只,雌雄各半,體重18-22g,按體重隨機(jī)分為6組:空白對(duì)照組(生理鹽水,腹腔注射),環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組(10mg/kg,腹腔注射),貞芪扶正膠囊組(3g/kg,灌胃給藥),注射用貞芪扶正高劑
8、量組(6.0g/kg,腹腔注射)、中劑量組(3.0g/kg,腹腔注射)、低劑量組(1.5g/kg,腹腔注射),每組10只。給藥容積均為0.2ml/10g體重,一天一次,連續(xù)7天。在上述開始給藥第3天,各腹腔注射20%綿羊紅細(xì)胞懸液0.2ml,末次給藥后1小時(shí)摘眼球取血,分離血清,測(cè)定每只鼠的半數(shù)溶血值(HC<,50>)。 3.2 注射用貞芪扶正對(duì)小鼠細(xì)胞免疫的影響(二硝基氟苯法):取小鼠60只,雌雄各半,體重18-22g,按體重
9、隨機(jī)分為6組,分組方法同3.1。給藥容積均為0.2ml/10g體重,一天一次,連續(xù)7天。在上述第2天給藥后致敏,末次給藥后1小時(shí)(致敏后第5天),進(jìn)行攻擊,攻擊24小時(shí)后,脫頸椎處死小鼠,剪下左右耳殼,用打孔器打取直徑8mm相同部位耳片稱重,同時(shí)取小鼠胸腺、脾臟稱重。左右耳片重量之差為腫脹度,并計(jì)算脾系數(shù)和胸腺系數(shù),比較空白對(duì)照組和各給藥組間差別的顯著性。 結(jié)論:1、注射用貞芪扶正對(duì)Co<'60>放療或環(huán)磷酰胺化療抗H<,22>
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