版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、口腔頜面部惡性腫瘤的發(fā)病率居全身惡性腫瘤的第六位,而其中至少有80%是鱗狀細(xì)胞癌??谇击[狀細(xì)胞癌惡性程度較高,且易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,預(yù)后較差,術(shù)后常繼發(fā)畸形,對患者的生活質(zhì)量造成極大的影響。舌鱗狀細(xì)胞癌(oraltongue squamous cell carcinoma OTSCC)是口腔癌中最常見的惡性腫瘤,約占口腔鱗癌的40%以上,其發(fā)病率、致死率位于口腔腫瘤的首位。近年來舌鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)病率呈明顯上升趨勢,有發(fā)病低齡化的傾向。在過
2、去的20年里,雖然傳統(tǒng)的治療方法如手術(shù)、放療、化療等都有一定程度的發(fā)展,但是口腔癌的預(yù)后仍然不能達(dá)到讓人滿意的效果;目前其5年生存率也只有50%~60%左右,并且大約1/3的患者會復(fù)發(fā);另外,經(jīng)過手術(shù)治療的患者吞咽、語言功能及面部容貌等受到較大影響,嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。因此,人們對新的治療方法如基因治療、免疫治療、靶向腫瘤干細(xì)胞治療等生物治療手段的關(guān)注越來越多。這些技術(shù)通常是通過特異性地作用于腫瘤細(xì)胞生長因子受體、信號傳導(dǎo)通路中特定的酶位
3、點及腫瘤細(xì)胞增殖、分裂、侵襲及轉(zhuǎn)移過程中相關(guān)基因等的特定靶點,特異性地殺死腫瘤細(xì)胞,但同時又極少損傷正常的人體細(xì)胞,能大大地降低對人體的毒性反應(yīng)。
FHL2(Four and a half LIM domains2)是LIM蛋白家族LIM-only亞類中的成員,LIM蛋白被定義為有一個或多個LIM結(jié)構(gòu)域、可以調(diào)節(jié)蛋白與蛋白間的相互作用的蛋白質(zhì)。FHL2蛋白由279個氨基酸組成,包括4.5個LIM結(jié)構(gòu)域;最初是在心肌細(xì)胞發(fā)現(xiàn)
4、,主要參與心肌細(xì)胞的分化及細(xì)胞生長調(diào)控。近期研究表明FHL2在多種組織的細(xì)胞分化及癌癥發(fā)生方面發(fā)揮重要作用,發(fā)揮轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子的功能,是雄激素受體(androgen receptor,AR)、cAMP響應(yīng)元件結(jié)合蛋白(cAMP responsive element binding protein,CREB)、激活蛋白1(activatorprotein1,AP-1)及胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白(insulin-like growth fa
5、ctorbinding protein5,IGFBP-5)等多種轉(zhuǎn)錄因子的共調(diào)節(jié)因子,在器官分化、發(fā)育、細(xì)胞凋亡、染色質(zhì)重建及腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中均發(fā)揮重要的調(diào)控作用。目前認(rèn)為,F(xiàn)HL2在多種腫瘤(包括前列腺癌,肝癌、卵巢上皮細(xì)胞癌等)的發(fā)生發(fā)展演化過程以及在腫瘤細(xì)胞的分化過程中起重要的作用,并且其作用具有組織依賴性,在一些腫瘤如卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌及胃癌中表達(dá)上調(diào),起轉(zhuǎn)錄共激活因子的作用,促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展,而在另一些組織如肝癌中
6、表達(dá)下調(diào),發(fā)揮轉(zhuǎn)錄共抑制因子的作用,抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。FHL2作用廣泛,且在不同癌組織中發(fā)揮不同的作用,而它與舌鱗狀細(xì)胞癌的關(guān)系目前尚未見國內(nèi)外相關(guān)研究報道。
本課題擬通過體內(nèi)及體外研究,利用免疫組化、流式細(xì)胞術(shù)、Real-time PCR及Western blot等技術(shù),檢測FHL2在舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及分布情況,初步探討FHL2在舌鱗狀細(xì)胞癌中可能發(fā)揮的作用;穩(wěn)定轉(zhuǎn)染FHL2真核表達(dá)載體,增強FHL2在舌鱗狀細(xì)胞癌
7、細(xì)胞系中的表達(dá),并將FHL2過表達(dá)細(xì)胞系接種于裸鼠皮下,觀察對舌鱗狀細(xì)胞癌生物學(xué)行為的影響,分析FHL2與舌鱗狀細(xì)胞癌的相關(guān)性及其作用機(jī)制,以期為臨床提供新的治療思路與方法。
根據(jù)實驗設(shè)計,本課題共包括三部分:
第一部分FHL2在不同分化水平舌鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及分布研究
在病理科收集舌鱗狀細(xì)胞癌病理切片,利用免疫組化的方法觀察并檢測FHL2在腫瘤組織中的表達(dá)與分布情況,對比不同分化水平舌鱗
8、癌細(xì)胞及癌旁組織之間FHL2表達(dá)的差異。初步探討FHL2在舌鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過程中可能發(fā)揮的作用。
第二部分FHL2過表達(dá)對舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Tca8113生物學(xué)行為的影響
利用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)增強FHL2在舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Tca8113中的表達(dá),采用MTT、Transwell、Real-time PCR、Western blot及流式細(xì)胞術(shù)等實驗技術(shù),觀察FHL2對舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞的生物學(xué)行為,包括細(xì)胞增殖
9、、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、侵襲遷移情況及可能的相關(guān)信號分子表達(dá)的影響,探討FHL2在舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞中發(fā)揮的作用及其可能的信號路徑機(jī)制。
本部分有三個實驗組成:
1.FHL2穩(wěn)定轉(zhuǎn)染舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系的建立。
利用脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將pcDNA3.0-FHL2基因轉(zhuǎn)入舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Tea8113中,建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染FHL2過表達(dá)的舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系模型pcDNA3.0-FHL2-Tca8113,同時建
10、立空載體舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系模型pcDNA3.0-Tca8113。
2.FHL2過表達(dá)對舌鱗狀細(xì)胞癌生物學(xué)行為的影響。
利用MTT、流式細(xì)胞術(shù)、Transwell小室細(xì)胞侵襲實驗及細(xì)胞劃痕等實驗手段檢測三組細(xì)胞(舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Tca8113、FHL2過表達(dá)舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系pcDNA3.0-FHL2-Tca8113及空載體舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系pcDNA3.0-Tca8113)之間細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡等
11、生物學(xué)特性的差異,分析FHL2過表達(dá)對舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。
3.FHL2在舌鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中作用機(jī)制的初步研究。
利用Real-time PCR及Western blot等技術(shù)檢測三種細(xì)胞系Tca8113、pcDNA3.0-FHL2-Tca8113及pcDNA3.0-Tca8113中舌鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)基因NF-KB、β-catenin等的表達(dá)情況,初步探討FHL2調(diào)控舌鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過程中
12、的分子機(jī)制。
第三部分舌鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系Tca8113中FHL2過表達(dá)對裸鼠成瘤的影響
將三種細(xì)胞系Tca8113、pcDNA3.0-FHL2-Tca8113及pcDNA3.0-Tca8113植入裸鼠皮下,選取3天、6天、9天、12天、15天、18天、21天、24天、27天及30天,觀察腫瘤的生長趨勢,對比三組之間的差別,分析FHL2過表達(dá)對舌鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展的影響。
結(jié)論:
1
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- Kif2a在舌鱗狀細(xì)胞癌中的作用及機(jī)制研究.pdf
- 轉(zhuǎn)錄共調(diào)節(jié)因子FHL2對人牙髓細(xì)胞分化及礦化的調(diào)控作用研究.pdf
- 鋅指轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子KLF4蛋白在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及意義.pdf
- FHL2在牙胚發(fā)育中的時空表達(dá)及作用機(jī)制的初步研究.pdf
- 己糖激酶2在喉鱗狀細(xì)胞癌中的作用和機(jī)制研究.pdf
- 尼古丁對舌鱗狀細(xì)胞癌增殖、遷移及侵襲的作用和初步機(jī)制研究.pdf
- EZH2、P57Kip2在舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義.pdf
- STK33及NGFR在頭頸鱗狀細(xì)胞癌中的作用及機(jī)制研究.pdf
- TIP30、OPN在舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義.pdf
- Rab23在皮膚鱗狀細(xì)胞癌侵襲中的作用及機(jī)制研究.pdf
- 氯喹在下咽鱗狀細(xì)胞癌化療中的作用及機(jī)制研究.pdf
- PTCH蛋白的舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義.pdf
- Cystatin B與Cystatin C在舌鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義.pdf
- 舌鱗狀細(xì)胞癌中細(xì)胞周期調(diào)控蛋白表達(dá)的研究.pdf
- 舌鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后多因素分析
- 白介素17在喉鱗狀細(xì)胞癌中的作用研究.pdf
- Sp1對FHL2轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制的研究.pdf
- mir-373在食管鱗狀細(xì)胞癌中的功能及作用機(jī)制研究.pdf
- miR-125b在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的作用及其機(jī)制研究.pdf
- 缺氧誘導(dǎo)因子-1α在皮膚鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及促進(jìn)細(xì)胞增殖作用.pdf
評論
0/150
提交評論