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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:以龍利葉SauropusrostratusMiq.的莖為研究對(duì)象,通過(guò)對(duì)其生藥鑒別、理化鑒別的研究,建立對(duì)廣西產(chǎn)龍利葉莖的HPLC指紋圖譜分析方法,為后續(xù)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究提供科學(xué)依據(jù)。對(duì)其水提液的急性毒性和對(duì)急性炎癥的抗炎作用進(jìn)行了藥效學(xué)研究,為臨床藥用和開發(fā)利用藥用資源提供前期的基礎(chǔ)科學(xué)研究。
方法:
(1)采用顯微鑒別對(duì)龍利葉莖進(jìn)行生藥鑒定研究。
(2)采用化學(xué)系統(tǒng)試驗(yàn)的方法對(duì)龍利葉莖中
2、可能存在的成分進(jìn)行化學(xué)試驗(yàn)。
(3)采用薄層色譜法對(duì)龍利葉莖進(jìn)行定性鑒別的研究。
(4)采用紫外-可見分光光度法(UV-vis法)分別對(duì)其95%乙醇、水、甲醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚提取液進(jìn)行光譜鑒別的研究。
(5)采用紅外光譜法對(duì)10批不同產(chǎn)地的龍利葉莖藥材粉末及浸膏進(jìn)行光譜定性鑒別。
(6)按照《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄中提供方法,進(jìn)行龍利葉莖藥材水分、灰分、浸出物等檢測(cè)
3、指標(biāo)的限量研究。
(7)采用HPLC法對(duì)廣西不同產(chǎn)地的龍利葉莖進(jìn)行指紋圖譜分析,建立廣西產(chǎn)龍利葉莖的HPLC指紋圖譜。
(8)采用改良寇氏法對(duì)龍利葉莖的水提取物進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn),測(cè)定其半數(shù)致死量。
(9)采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹、醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響及小鼠棉球肉芽腫等模型,觀察龍利葉莖水提液抗炎作用。
結(jié)果:
(1)龍利葉的莖主要顯微特征是:①木栓層由
4、7~12列細(xì)胞,皮層中含有很多淀粉粒,并含有纖維束,韌皮部狹窄,木質(zhì)部寬,射線明顯,髓部大;②粉末可見網(wǎng)紋、螺紋及梯紋導(dǎo)管、伴有含草酸鈣簇晶薄壁細(xì)胞,淀粉粒較小,并有纖維等。
(2)系統(tǒng)化學(xué)預(yù)試實(shí)驗(yàn)表明,龍利葉莖藥材中可能含有蛋白質(zhì),氨基酸和多肽,苷類和皂苷,有機(jī)酸類,糖類,香豆素和內(nèi)酯,生物堿等化學(xué)成分。
(3)薄層定性鑒別中,用三種不同展開系統(tǒng)展開得到的斑點(diǎn)均與對(duì)照藥材有較好的對(duì)應(yīng),且三種展開分離效果都較
5、好。
(4)龍利葉莖藥材不同溶劑的提取液在紫外-可見光區(qū)都有特有的吸收峰,特別是石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、乙醇提取液的特征吸收峰較多、較強(qiáng)。這些特征均具有一定的鑒別意義。
(5)10批龍利葉莖藥材粉末及浸膏的紅外光譜圖相關(guān)系數(shù)都在0.8以上。從整體面貌輔助鑒定龍利葉莖藥材的真實(shí)性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。
(6)根據(jù)水分、灰分、熾灼殘?jiān)敖鑫餃y(cè)定,擬規(guī)定龍利葉莖的水分含量不高于9.53%;總灰分含
6、量不高于8.69%;酸不溶性灰分含量不高于0.3%;熾灼殘?jiān)坎桓哂?3.05%,龍利葉莖的浸出物含量不低于13.96%。
(7)建立廣西龍利葉莖HPLC指紋圖譜:檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm,梯度洗脫,在65min內(nèi)記錄藥材的指紋圖譜。HPLC指紋圖譜標(biāo)定了14個(gè)共有峰。10批龍利葉莖藥材指紋圖譜相似度較好,各批藥材與對(duì)照指紋圖譜間的相似度均在0.8以上。
(8)龍利葉莖水提物的LD50為160.55g/kg,L
7、D5095%的可信限155.2~166.07g/kg。
(9)龍利葉莖水提液的高劑量對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和小鼠棉球肉芽腫有明顯的抑制,能降低醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性,中劑量和低劑量對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹及小鼠棉球肉芽腫有抑制作用,但是降低醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的作用不明顯,說(shuō)明龍利葉莖的水提液有一定的抗炎作用。
結(jié)論:①對(duì)廣西產(chǎn)龍利葉莖進(jìn)行生藥顯微鑒定、理化鑒別、化學(xué)預(yù)實(shí)驗(yàn)和光譜鑒別研究,
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