NBS1、XPC基因單核苷酸多態(tài)與宮頸癌易感性相關研究.pdf

1、目的:
　　宮頸癌被認為是第二常見的發(fā)生在婦女身上的惡性腫瘤,83％的案例發(fā)生在發(fā)展中國家。目前己經確定,人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是宮頸癌發(fā)生的一個重要危險因素。盡管許多婦女都感染了高危型的HPV,但最終發(fā)展成為宮頸癌的婦女僅僅是一小部分,這表明了遺傳易感性也是宿主感染HPV后能否發(fā)展成為腫瘤的關鍵性因素。
　　從遺傳角度看,人與人之間之所以存在各種各樣的差異,是由于個體間存在著

2、基因型的差異?；虻亩鄳B(tài)構成了基因型的差異,而單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNP)又是基因多態(tài)的三種類型中最為常見的一種,占所有已知多態(tài)性的90%以上。本研究擬通過判斷DNA損傷修復基因NBS1、XPC的多核苷酸多態(tài)位點各基因型在宮頸癌組和正常對照組中的分布,分析其與宮頸癌發(fā)生風險之間的關系。并且了解DNA損傷修復基因NBS1、XPC單核苷酸多態(tài)性與宮頸癌病理分類的關系;了解DNA損傷修

3、復基因NBS1、XPC的單核苷酸多態(tài)性與宮頸癌臨床分期的關系。從中探討NBS1、XPC基因單核苷酸多態(tài)性與行為危險因素間的相互關系對宮頸癌易感性的影響,為臨床上預防和早期治療宮頸癌提供了一個全新的方向。
　　材料與方法:
　　本研究收集了139例宮頸癌患者及264例健康對照者的血液樣本,并提取基因組DNA。其中病例組的樣本來自于2008年-2011年廣東省婦幼保健院就診的并且經過組織病理學確診的宮頸癌患者的血液樣品。而對照組

4、樣本來自于宮頸組織正常者(同期到我院行全子宮切除患者,術后病理確診無宮頸癌及癌前病變)。在收集血液標本的同時,我們收集每個研究對象詳細的人口學資料(包括了年齡、首次性生活年齡、性伴侶個數(shù)、產次、初產年齡、性傳播疾病史、腫瘤家族史、吸煙、社會經濟條件和受教育程度等資料)。所有病例組患者與對照組個體間均無血緣關系,均知情同意。
　　根據文獻選取DNA損傷修復基因NBS1、XPC的Glu185Gln、Lys939Gln、Ala499Va

5、l為研究位點,各位點在中國漢族人群中的最小基因型頻率大于5%。采用聚合酶鏈式反應-限制性片段長度多態(tài)(PCR-RFLP)方法對各多態(tài)位點進行基因分型。應用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計。利用Goodness-of-fit χ2檢驗對健康對照組多態(tài)位點的基因型分布進行分析并確認其是否符合Hardy-Weinberg平衡;Pearson’s χ2檢驗比較宮頸癌患者與健康對照組的基因型分布差異是否有統(tǒng)計學意義;多因素非條件邏輯回歸計算比值比(o

6、dds ratios,OR)及其95%置信區(qū)間CI,分析基因型與宮頸癌發(fā)生危險性的關系,并且使用年齡進行校正。所有的統(tǒng)計檢驗均為雙側概率檢驗。
　　結果:
　　本次實驗結果顯示,宮頸癌組與健康對照組在年齡、性伴侶個數(shù)、第一次性生活年齡、吸煙習慣等方面是無顯著統(tǒng)計學差異(P=0.732;P=0.156;P=0.705;P=0.377),但初產年齡及懷孕次數(shù)在兩組間是有明顯統(tǒng)計學差異的(P<0.001)。在對照組中NBS1、XP

7、C基因Glu185Gln、Lys939Gln、Ala499Val各位點基因型基因頻率分布符合Hardy-Weinberg平衡。
　　1.NBS1基因Glu185Gln(rs1805794)多態(tài)位點在病例組與對照組間基因型頻率分布差異有統(tǒng)計學意義(χ2=7.480,P=0.024)。通過非條件邏輯回歸統(tǒng)計發(fā)現(xiàn),以CC基因型作為參照,GC和GG基因型均與其進行比較,可發(fā)現(xiàn)每增加一個等位基因G,患宮頸癌的風險就會增加(GC的OR=1.6

8、57,95%CI=0.97-2.83;GG的OR=2.231,95%CI=1.25-3.99)。并且GG基因型增加個體患宮頸癌風險的趨勢在Ⅰ期的宮頸癌患者中更加顯著(GG vs CC:調整后的OR=3.703,95%CI=1.559～8.798,P=0.003)。
　　2.XPC基因Lys939Gln(rs2228001)多態(tài)位點的Lys/Lys(AA)、Lys/Gln(AC)和Gln/Gln(CC)基因型在對照組中基因型頻率分別

9、為43.2%、43.2%和13.6%,宮頸癌患者中分別為44.6%、39.6%和15.8%,通過Pearson’s X2檢驗,得到宮頸癌患者與對照組的基因型分布差異無顯著性(χ2=0.629,P=0.730)。通過非條件邏輯回歸統(tǒng)計分析,在Lys939Gln位點中以Lys/Lys基因型作為參照,Lys/Gln和Gln/Gln基因型與其進行比較,發(fā)現(xiàn)均與宮頸癌易感無相關性(OR值分別為0.890和0.789,95%CI分別為0.482～1

10、.468和0.425~1.468)。
　　3.XPC基因Ala499Val(rs2228000)多態(tài)位點的的Ala/Ala(CC)、Ala/Val(CT)、Val/Val(TT)基因型在病例組中的頻率分別為34.5%、44.6%和20.9%,在對照組中分別是39.4%、45.5%和15.2%,兩組間基因型頻率分布差異亦無統(tǒng)計學意義(χ2=2.320,P=0.313)。通過非條件邏輯回歸統(tǒng)計分析,在Ala499Val位點中,以Ala

11、/Ala基因型作為參照,Ala/Val、Val/Val基因型與其進行比較,發(fā)現(xiàn)其與宮頸癌易感無相關性(OR值分別為0.637和0.713,95%CI分別為0.354～1.146和0.404～1.257)。
　　結論:
　　1.NBS1 Glu185Gln基因多態(tài)性可能與廣東地區(qū)漢族婦女宮頸癌的發(fā)生相關,G等位基因可能是影響宮頸癌易感的一個風險因素。攜帶NBS1 Glu185Gln G等位基因的個體較攜帶C等位基因個體發(fā)生宮頸

12、癌的風險高1.49倍。因此檢測NBS1 Glu185Gln基因多態(tài)性可能成為檢測宮頸癌的一個有效腫瘤標志物。
　　2.NBS1 Glu185Gln G等位基因增加個體患宮頸癌風險的趨勢在Ⅰ期的宮頸癌患和宮頸鱗狀細胞癌患者中更加顯著,是攜帶NBS1 Glu185Gln C等位基因的個體的1.71倍和1.76倍。
　　3.XPC基因的Lys939Gln、Ala499Val多態(tài)位點在宮頸癌組及對照組的基因型頻率分布無顯著的差異,廣