凡納濱對(duì)蝦抗WSSV性狀遺傳參數(shù)評(píng)估及與中國明對(duì)蝦抗WSSV性狀差異研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus vannamei）和中國明對(duì)蝦（Fenneropenaeus chinensis）為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，采用單尾、定量的方法進(jìn)行白斑綜合征病毒（white spot syndrome virus,WSSV）口飼感染，對(duì)凡納濱對(duì)蝦新品種“壬海1號(hào)”體重性狀和抗WSSV存活時(shí)間遺傳力以及兩者的遺傳相關(guān)進(jìn)行評(píng)估，并從WSSV侵染后相同溫度和不同溫度條件下感染W(wǎng)SSV后存活時(shí)間、存活率以及感染后不同時(shí)間對(duì)蝦體內(nèi)

2、病毒載量等多個(gè)角度，進(jìn)一步比較凡納濱對(duì)蝦和中國明對(duì)蝦對(duì)WSSV的敏感性差異；以期闡明不同對(duì)蝦種類對(duì)WSSV抗病性的差異及影響因素，為抗病良種選育工作提供理論基礎(chǔ)與參考。具體研究?jī)?nèi)容如下：
　　1.凡納濱對(duì)蝦體重和抗WSSV性狀遺傳參數(shù)評(píng)估
　　為評(píng)估4月齡凡納濱對(duì)蝦“壬海1號(hào)”體重性狀和抗WSSV性狀的遺傳參數(shù)，對(duì)101個(gè)家系的3000尾凡納濱對(duì)蝦進(jìn)行為期15 d的抗WSSV性能測(cè)試。利用動(dòng)物模型估計(jì)其體重和抗WSSV性狀遺

3、傳力以及兩者的遺傳相關(guān)。結(jié)果表明，凡納濱對(duì)蝦“壬海1號(hào)”體重的遺傳力估計(jì)值為0.104±0.276，感染W(wǎng)SSV后存活時(shí)間的遺傳力估計(jì)值為0.145±0.073，均屬于低等遺傳力水平，經(jīng)統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)差異顯著（P＜0.05）。體重與感染 WSSV后存活時(shí)間遺傳相關(guān)與表型相關(guān)系數(shù)分別為0.69和0.47，屬于中度正相關(guān)，Z-score檢驗(yàn)結(jié)果達(dá)到極顯著水平（P＜0.01）。結(jié)果表明，本群體中遺傳變異較小，可以考慮通過多構(gòu)建家系，提高選擇強(qiáng)度等方

4、法進(jìn)行改良。并且需要采用經(jīng)濟(jì)加權(quán)或者百分比加權(quán)的形式，制定多性狀綜合選擇方案，以培育出綜合性狀的優(yōu)良品種。
　　2.中國明對(duì)蝦和凡納濱對(duì)蝦對(duì)白斑綜合征病毒(WSSV)敏感性比較
　　本實(shí)驗(yàn)分別對(duì)中國明對(duì)蝦野生群體（Wild- F.chinensis,W-Fc）、中國明對(duì)蝦選育群體“黃海2號(hào)”（ Selected- F.chinensis,S-Fc）和凡納濱對(duì)蝦商業(yè)一代苗種（Commercial-L.vannamei,C-Lv

5、）三組對(duì)蝦采用單尾定量飼喂感染W(wǎng)SSV的方法進(jìn)行感染實(shí)驗(yàn)，比較W-Fc、S-Fc及C-Lv對(duì)WSSV的敏感性差異。結(jié)果表明，感染同等含量WSSV后，W-Fc、S-Fc和C-Lv的平均存活時(shí)間分別為124.11±39.49 h、166.15±51.54 h和136.90±41.99 h，顯示出三組對(duì)蝦間的平均存活時(shí)間存在顯著性差異（P＜0.05）。三組對(duì)蝦在感染期間的死亡趨勢(shì)為：W-Fc在第96 h達(dá)到死亡高峰，并且一直持續(xù)到216 h；

6、S-Fc和C-Lv在144 h出現(xiàn)死亡高峰。另外，分別在感染后的第3 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h、144 h共8個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)三組對(duì)蝦進(jìn)行活體取樣，利用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR（Real Time-Polymerase Chain Reaction）技術(shù)對(duì)其進(jìn)行了病毒載量檢測(cè)，從對(duì)蝦存活時(shí)間和體內(nèi)肌肉組織病毒載量的角度探尋不同對(duì)蝦抗病性能的差異，結(jié)果如下：第48 h時(shí)，W-Fc、S-Fc和C-Lv三組對(duì)蝦體

7、內(nèi)肌肉組織的病毒載量分別為1.22×106±6.14×105 copies/ng DNA、7.10×103±7.26×102 copies/ng DNA和1.50×104±4.19×103 copies/ng DNA；第144 h時(shí)，三組對(duì)蝦體內(nèi)肌肉組織病毒載量分別為8.44×106±1.25×106 copies/ng DNA、3.21×106±8.21×105 copies/ng DNA和1.49×106±6.59×105 copi

8、es/ng DNA。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示三組對(duì)蝦對(duì)WSSV敏感性從高到低依次為中國明對(duì)蝦野生群體、凡納濱對(duì)蝦商業(yè)苗種、中國明對(duì)蝦選育群體，表明中國明對(duì)蝦選育群體“黃海2號(hào)”在人工感染W(wǎng)SSV條件下表現(xiàn)出了良好的抗病性能。
　　3.不同溫度下凡納濱對(duì)蝦和中國明對(duì)蝦對(duì)白斑綜合征病毒(WSSV)耐受性比較
　　分別對(duì)凡納濱對(duì)蝦“壬海1號(hào)”（L.vannamei“Renhai No.1”）和中國明對(duì)蝦“黃海2號(hào)”（F.chinensis“H

9、uanghai No.2”）在三種溫度條件下（24℃、28℃和32℃），采用單尾定量飼喂感染白斑綜合征病毒的方法進(jìn)行感染實(shí)驗(yàn)，比較兩組對(duì)蝦在不同溫度情況下對(duì)WSSV的耐受性差異。結(jié)果表明，L-24℃和F-24℃組的平均存活時(shí)間分為184.05±69.56 h和101.68±38.45 h；L-28℃和F-28℃組的平均存活時(shí)間分別為100.25±26.79 h和73.38±22.22 h，相同溫度組內(nèi)均存在顯著性差異（P＜0.05）；截

10、至第15 d，L-32℃和F-32℃組的存活率分別為45.74％和23.47%。三個(gè)溫度組對(duì)蝦在50%死亡率時(shí)的存活時(shí)間分別為178 h和98 h、98 h和74 h、292 h和78 h；死亡高峰時(shí)間分別為第5d和第4d、第5d和第4d、第10d和第4d。另外，分別在感染后的第12 h、24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h、168 h、15 d共9個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)每組對(duì)蝦進(jìn)行活體取樣，利用實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)對(duì)其進(jìn)行了

11、病毒載量檢測(cè)，從對(duì)蝦體內(nèi)肌肉組織病毒載量的角度探尋不同對(duì)蝦抗病性能的差異。第144 h時(shí)，L-24℃和 F-24℃組對(duì)蝦肌肉內(nèi)病毒載量分別達(dá)到2.97×106±7.44×106和8.08×106±3.22×106 copies/ng DNA，差異極顯著（P＜0.01），L-28℃和F-28℃組分別達(dá)到6.73×106±1.49×106和1.20×107±6.15×105 copies/ng DNA，表現(xiàn)出極顯著差異（P＜0.01）；第1