兩株潛在益生菌安全性評價及其對凡納濱對蝦生長、免疫相關(guān)酶活力、抗WSSV能力的影響.pdf

1、近年來，對蝦養(yǎng)殖業(yè)疾病頻發(fā)，已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的瓶頸。抗生素被禁止使用之后，人們迫切需要有效的技術(shù)手段以增強對蝦免疫機能從而提高對蝦抗病力。益生菌具有改善養(yǎng)殖環(huán)境、促進對蝦生長、增強對蝦免疫機能等作用，在對蝦養(yǎng)殖中被廣泛應用。本研究以實驗室篩選獲得的兩株潛在益生菌（芽孢桿菌BZ5株和溶藻弧菌VZ5株）為研究對象，探討其在生產(chǎn)應用中的安全性及其對凡納濱對蝦生長、免疫相關(guān)酶活力、抗WSSV能力的影響，以期為益生菌在對蝦養(yǎng)殖中的開發(fā)及應

2、用提供理論基礎和技術(shù)支持。本研究主要研究內(nèi)容包括:1.通過溶血實驗、藥敏實驗、注射感染實驗和浸泡感染實驗探討這兩株菌對養(yǎng)殖環(huán)境及對蝦的安全性問題;2.水體中添加不同濃度芽孢桿菌BZ5株和溶藻弧菌VZ5株對對蝦生長、消化酶活力、免疫相關(guān)酶活力和抗WSSV能力的影響，從而得出芽孢桿菌和溶藻弧菌影響凡納濱對蝦相關(guān)酶活的最佳濃度;3.注射和浸泡相同濃度下的芽孢桿菌BZ5株和溶藻弧菌VZ5株對對蝦消化酶活力、免疫相關(guān)酶活力和抗WSSV能力的影響。

3、本研究主要研究結(jié)果如下:
　　1.通過溶血實驗和藥敏實驗發(fā)現(xiàn)，芽孢桿菌BZ5株和溶藻弧菌VZ5株都不產(chǎn)生溶血現(xiàn)象;芽孢桿菌BZ5株對頭孢氨芐、頭孢唑啉、頭孢拉定等14種抗生素敏感，溶藻弧菌VZ5株對新霉素、紅霉素等4種抗生素敏感，對哌拉西林、頭孢氨芐、頭孢唑啉等8種抗生素中度敏感，因此確定兩株菌株在環(huán)境中使用安全;通過注射感染實驗和浸泡實驗發(fā)現(xiàn)，芽孢桿菌BZ5株和溶藻弧菌VZ5株在106cfu/mL濃度下對凡納濱對蝦無明顯的毒害作

4、用。
　　2.通過不同濃度芽孢桿菌BZ5株和溶藻弧菌VZ5株浸泡實驗發(fā)現(xiàn):(1)水體中的芽孢桿菌BZ5株（密度為104cfu/mL）能夠更好地提高凡納濱對蝦的生長和存活率，對蝦終末體重和成活率分別達到（9.00g±0.36g）和（86.11℃±6.80℃），比對照組分別提高70.45℃和19.23℃。水體中的溶藻弧菌VZ5株（密度為104cfu/mL）能夠更好地促進對蝦生長，對蝦終末體重達到（6.69g±0.21 g），比對照組增

5、加26.70℃;水體中的溶藻弧菌VZ5株（密度為108cfu/mL）能夠更好地提高對蝦的存活率（91.67℃±9.13℃），比對照組提高26.93℃;(2)104cfu/mLBZ5組、106cfu/mL BZ5組、104cfu/mL VZ5組、106cfu/mL VZ5組和108cfu/mL VZ5組對蝦的胰蛋白酶、淀粉酶活力顯著高于對照組(P＜0.05)?？傮w上，水體中的芽孢桿菌BZ5株（密度為106cfu/mL）和溶藻弧菌VZ5株（

6、密度為106cfu/mL）提高凡納濱對蝦消化酶的活力效果明顯;(3)104cfu/mL BZ5組、106cfu/mL BZ5組、104cfu/mL VZ5組、106cfu/mL VZ5組和108cfu/mL VZ5組對蝦的SOD、POD、抗菌酶、PO活力整體上顯著高于對照組(P＜0.05)?？傮w上講，水體中的芽孢桿菌BZ5株（密度為106cfu/mL）和溶藻弧菌VZ5株（密度為106cfu/mL）提高凡納濱對蝦免疫相關(guān)酶活力效果明顯;(

7、4) WSSV感染后，104cfu/mL BZ5組、106cfu/mL VZ5組和108cfu/mL VZ5組對蝦半數(shù)致死時間(LT50)分別比對照組延長29.49％、15.39℃、1.28℃，而106cfu/mL BZ5組在168h時的累計死亡率為45.45℃。實驗表明，水體中的芽孢桿菌BZ5株（密度為106cfu/mL）和溶藻弧菌VZ5株（密度為106c fu/mL）可以不同程度的提高凡納濱對蝦抗WSSV能力。
　　13.通過

8、注射和浸泡相同濃度的芽孢桿菌BZ5株和溶藻弧菌VZ5株發(fā)現(xiàn):(1)芽孢桿菌組和溶藻弧菌組對蝦的胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活力整體上顯著高于對照組（P＜0.05），芽孢桿菌組對蝦的胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活力整體上高于溶藻弧菌組;(2)芽孢桿菌組和溶藻弧菌組對蝦的SOD、POD活力整體上顯著高于對照組(P＜0.05)，芽孢桿菌組對蝦的SOD、POD活力整體上高于溶藻弧菌組;(3)感染W(wǎng)SSV后，凡納濱對蝦的半數(shù)致死時間(LT50):哈維氏弧