β-catenin，PTEN和TGF-β-,1-在皮膚鱗癌和基底細(xì)胞癌中的表達(dá)及相關(guān)性分析.pdf

1、背景與目的 皮膚鱗狀細(xì)胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)和基底細(xì)胞癌(basal cellcarcinoma,BCC)是人類最常見(jiàn)的兩類皮膚惡性腫瘤。但發(fā)生機(jī)制目前仍未完全闡明。 浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的本質(zhì)特征之一，而腫瘤細(xì)胞要想脫離原發(fā)灶向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，就必須克服細(xì)胞之間的黏附作用。β-連環(huán)素(β-catenin,β-cat)作為一種多功能蛋白質(zhì)，它能夠在細(xì)胞膜與E-鈣粘素(E-cadherin

2、，E-cad)組成E-cad／cat復(fù)合體，參與細(xì)胞之間的黏附，具有抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的作用；同時(shí)又可以在細(xì)胞漿(核)內(nèi)聚集，作為核心元件介導(dǎo)Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路從細(xì)胞外到細(xì)胞內(nèi)的傳遞，促進(jìn)腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移，成為目前人們研究惡性腫瘤發(fā)生機(jī)制的一個(gè)熱點(diǎn)。 第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶和張力蛋白同源物基因(Phosphatase and tensinhomolog deleted on chromosome ten，PTEN)是新近

3、發(fā)現(xiàn)的一種抑癌基因，其編碼蛋白具有磷酸酶活性，能特異性的使蛋白質(zhì)底物中的酪氨酸殘基去磷酸化，負(fù)性調(diào)控磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，P13K)／蛋白激酶B(protein kinase B，PKB)信號(hào)通路。有研究指出PTEN蛋白可以保持細(xì)胞膜上β-cat殘基的去磷酸化而維持E-cad／cat復(fù)合體的穩(wěn)定性，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移。 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β<,1>(Transformi

4、ng growth factor-beta<,1>，TGF-β<,1>)與PTEN蛋白作用相反，可以磷酸化β-cat的殘基，導(dǎo)致β-cat從細(xì)胞膜到細(xì)胞漿的游離。其在正常上皮組為探討β-cat，PTEN和TGF-β<,1>三種蛋白存SCC和BCC形成和發(fā)展中的作用，本課題采用免疫組織化學(xué)染色SP法檢測(cè)了30例SCC、20例BCC和15例正常皮膚組織中三種蛋白的表達(dá)情況，并分析它們之間的相互關(guān)系，希望能為預(yù)防和治療該類疾病提供一種新的思路

5、和方法。 材料和方法 30例皮膚鱗狀細(xì)胞癌組織和20例基底細(xì)胞癌組織均選自鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2002年至2005年存檔蠟塊，取材部位分別來(lái)自頭皮、面部、四肢等，其中男性24例，女性26例，年齡25-88周歲，平均56.22±17.41歲；正常皮肽組織25例，來(lái)自2004年至2005年鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院整形外科非癌患者全厚皮片。根據(jù)WHO提供分級(jí)方法，將SCC分為三級(jí)，其中Ⅰ級(jí)鱗癌22例，Ⅱ級(jí)鱗癌6例，Ⅲ級(jí)鱗癌2

6、例。實(shí)驗(yàn)采用免疫組化SP法，正常皮肽組織作為對(duì)照組，已知陽(yáng)性組織作為陽(yáng)性對(duì)照(試劑公司提供)，PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。所有數(shù)據(jù)應(yīng)用統(tǒng)計(jì)軟件包SPSS13.0進(jìn)行分析，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果 1.β-eat在SCC和BCC中的表達(dá)情況：β-cat在正常皮膚組織主要定位于細(xì)胞膜，SCC中胞膜表達(dá)缺失代之以胞漿(核)出現(xiàn)大量異常聚集。SCC中β-cat的膜表達(dá)缺失率和異位表達(dá)率均高于

7、正常皮膚，但與腫瘤細(xì)胞的病理分級(jí)無(wú)明顯相關(guān)性(P=0.638>0.050)；BCC中胞膜表達(dá)減弱但未明顯消失，同時(shí)胞漿胞核出現(xiàn)大量異染。BCC中β-cat的的異常表達(dá)率為70.00％(14/20)高于正常皮膚組織的異常表達(dá)率12.00％(3/25)(P=0.000<0.050)，但膜表達(dá)缺失率無(wú)顯著差異。兩種癌組織間β-cat的異常表達(dá)率亦無(wú)明顯差異性(P=0.599>0.050)。 2.PTEN蛋白在SCC和BCC中的表達(dá)情況

8、：PTEN蛋白陽(yáng)性表達(dá)主要定位于細(xì)胞漿。SCC中PTEN蛋白多數(shù)表達(dá)缺失，陽(yáng)性表達(dá)率僅為30.00％(9/30)，遠(yuǎn)低于正常皮膚組織中92.00％(23/25)和BCC中60.00％(12/20)的陽(yáng)性表達(dá)率(P=0.000<0.050，P=0.035<0.050)，但與腫瘤細(xì)胞的分化程度無(wú)明顯相關(guān)性(P=0.215>0.050)；BCC中PTEN蛋白陽(yáng)性表達(dá)率低于J下常皮膚，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.027<0.050)。 3

9、.TGF-β<,1>在SCC和BCC中的表達(dá)情況：TGF-β<,1>的陽(yáng)性表達(dá)位于細(xì)胞漿。SCC中出現(xiàn)明顯的TGF-β<,1>陽(yáng)性高表達(dá)，陽(yáng)性表達(dá)率為73.33％(22／30)，明顯較BCC中45.00％(9／20)和正常皮膚中24.00％(6／25)的陽(yáng)性表達(dá)率高(分別為P=0.043<0.050，P=0.000<0.050)，而與腫瘤病理分級(jí)無(wú)明顯相關(guān)性(P=1.000>0.050)；正常皮膚組織的TGF-β<,1>陽(yáng)性表達(dá)率與BC

10、C相比差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.138>0.050)。 4.相關(guān)性分析：β-cat在SCC和BCC的正常表達(dá)與PTEN蛋白的陽(yáng)性表達(dá)呈正相關(guān)(P=0.003<0.050，r=0.419)，而與TGF-β<,1>的陽(yáng)性表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P=0.018<0.050，r=-0.381)。同時(shí)，PTEN蛋白的陽(yáng)性表達(dá)和TGF-β<,1>的陽(yáng)性表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.503，P=0.000<0.050)。 結(jié)論 1.β-cat

11、在SCC中出現(xiàn)明顯的胞膜表達(dá)缺失和異位表達(dá)，提示β-cat的異常表達(dá)導(dǎo)致的細(xì)胞黏附功能破壞和Wnt信號(hào)通路的異常激活在SCC的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能起到了重要作用。但其與SCC的分化沒(méi)有明顯關(guān)系。 2.β-cat在BCC中出現(xiàn)明顯異位表達(dá)，但膜表達(dá)缺失并不明顯，提示W(wǎng)nt信號(hào)的異常激活也可能參與了BCC的形成過(guò)程。而β-cat介導(dǎo)的黏附功能破壞與BCC的發(fā)生關(guān)系不明顯。 3.SCC中出現(xiàn)PTEN蛋白表達(dá)的經(jīng)常性缺失和TGF-