整合素及相關(guān)免疫因子與糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制及應(yīng)用霉酚酸酯干預(yù)研究.pdf

1、目的研究整合素、OPN、TGF．βl、CTGF在大鼠糖尿病腎病中的作用；探討應(yīng)用免疫抑制劑治療糖尿病腎病的可行性及其免疫作用機(jī)制。 方法36只SD大鼠隨機(jī)取10只作為健康對(duì)照(A組)，其余26只均腹腔注射STZ誘導(dǎo)DM模型，4周后篩選尿白蛋白排泄率(UA_ER)>20μg／min者，再隨機(jī)分為B、C兩組；C組給予霉酚酸酯10mg／kg/d灌胃(MMF干預(yù)組)，B組給予等體積生理鹽水灌胃(DN對(duì)照組)。觀察血糖、腎功能、24h尿蛋

2、白排泄量變化。2mo后處死，病理切片觀察腎組織病理改變；免疫組化檢測(cè)腎臟整合素、OPN、TGF．β1、CTGF的表達(dá)。隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)腎小球橫切面表達(dá)相關(guān)因子染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，取平均數(shù)即為腎小球橫切面平均陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。隨機(jī)取5個(gè)腎小管高倍視野并計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，取平均數(shù)即為腎小管平均陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。 結(jié)果1、與健康對(duì)照組(A組)相比，DN對(duì)照組(B組)和霉酚酸酯干預(yù)組(C組)的血糖、腎重／體重比、尿蛋白水平明顯上升，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0

3、．01)。2、病理切片提示存在糖尿病腎病的小球病變和小管間質(zhì)病變。3、整合素Bl在小球中散在表達(dá)，B組小球中表達(dá)(19．254-4．65)較A組(4．804-2．89)增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．01)。C組表達(dá)(16．834-4．53)較B組有下降(P<0．05)，但仍明顯高于A組(P<0．01)。在小管間質(zhì)呈普遍表達(dá)，各組間未見明顯差異。4、整合素a5在小球中無(wú)表達(dá)，A組可見小管及間質(zhì)中少量表達(dá)(14．06±6．90)，B組中表

4、達(dá)增多(195．924-44．61)并呈片狀分布，較A組差異顯著(P<0．01)。C組中亦片狀分布(162．33±21．29)，但較B組有減少(P<0．05)。5、整合素§3在健康大鼠小球和小管中均有表達(dá)，A組小球中偶見表達(dá)(1．50±1．20)，B組小球中表達(dá)增多(19．25±4．65)，較A組相比有顯著差異(P<0．01)。C組表達(dá)較B組有下降(16．834-4．53)(P<0．05)，但仍明顯高于A組(P<0．01)。小管間質(zhì)中亦

5、呈普遍表達(dá)。6、OPN僅見表達(dá)于小管間質(zhì)，其中A組見散在表達(dá)(52．20±9．56)，在B組中片狀分布(232．50±32．41)，較A組明顯增多(P<0．01)。C組(182．9+28．7)較B組有所減少(P<0．05)，較A組仍明顯增多(P<0．01)。7、TGF-β1在小球中可見散在表達(dá)，在B組(20．25±4．77)和C組(14．92±3．94)小球中的表達(dá)均明顯高于A組(2．80±1．47)(P<0．01)(P<0．01)。C

6、組較B組顯著下降(P<0．05)。在小管中成片表達(dá)，B組(350．67±77．36)和C組(266．75±61．27)亦較A組(45．50±12．82)明顯增多(P<0．01)(P<0．01)，C組較B組亦呈顯著下降趨勢(shì)(P<0．05)。8、CTGF在正常小球中幾乎不表達(dá)(1．O±0．54)，B組(12．25±3．25)和C組(10．67±2．54)小球中表達(dá)明顯增多(P<0．01)(P<0．01)。小管中各組CTGF均明顯表達(dá)，B組(

7、333．42_+46．76)和C組(288．58±29．86)均較A組(47．60+10．2)顯著增加(P<0．01)(P<0．01)，C組較B組有所下降(P<0．05)。9、整合素B1、Q5、B3、OPN、TGF—B1、CTGF的表達(dá)與尿蛋白、腎重體重比呈正相關(guān)，且各因子之間呈正相關(guān)(P<0．01)。 結(jié)論1、DM模型的整合素βl、Q5、β3、OPN、TGF．β1、CTGF的表達(dá)在DN腎臟中顯著增多，相互之間呈正相關(guān)，且與尿蛋