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文檔簡介
1、目的:
探討脂肪干細胞的分離培養(yǎng)增殖,膠原的產生和轉化生長因子—β1對其增殖和膠原產生的影響。
方法:
從鼠腹股溝區(qū)脂肪分離出干細胞并培養(yǎng),通過倒置相差顯微鏡觀察細胞的形態(tài)、生長增殖情況;并描繪細胞生長曲線;用流式細胞儀對細胞表面標志物進行檢測。將培養(yǎng)的細胞分為4個組,分別加入5μg/L,10μg/L的TGF-β1,對照組不加TGF-β1,培養(yǎng)后,檢測細胞的數(shù)量和膠原產生量,并與使用不含TGF-
2、β1培養(yǎng)的對照組及不同濃度TGF-β1組之間比較。
結果:
脂肪組織中確實存在MSCs,其分離成功率為56%;通過倒置相差顯微鏡觀察,發(fā)現(xiàn)脂肪來源的MSCs呈貼壁生長,外觀為成纖維細胞樣外觀,細胞排列呈螺旋狀;生長曲線顯示無論原代還是傳代培養(yǎng)的脂肪來源的MSCs的生長曲線都為S型,其中細胞增殖能力最強的是第3代和第5代;此外,AMSCs可以產生Ⅰ型膠原組織,TGF-β1在一定濃度范圍內對AMSCs增殖數(shù)目的影
3、響無顯著性差異,但能顯著性地增加Ⅰ型膠原組織產生(P<0.05)。流式細胞儀檢測結果顯示,UCB-MSCs均穩(wěn)定的表達與MSCs相關的表面抗原標志物CD29、CD44和CD90等,不表達造血標志CD34和CD45。
結論:
MSCs可從脂肪組織中分離并培養(yǎng),其成功率較高;脂肪來源的間充質干細胞的生長特性類似于呈纖維母細胞;其具有和骨髓MSCs相似的細胞表面標志物、形態(tài)學特征以及生長增殖特點等生物學特性,自我更
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