加壓培養(yǎng)對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活狀態(tài)的影響.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名：中國醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)

2、使用授權(quán)書本人完金了解中國醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬中國醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為中國醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容(保密內(nèi)容除外)，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名

3、：日一獸中文論著摘要加壓培養(yǎng)對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存活狀態(tài)的影響目的青光眼是世界第二大致盲性眼病，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(Retinalganglioncells，RGCs)的凋亡是青光眼發(fā)病的基本病理機(jī)制，眼內(nèi)壓升高是最重要的危險(xiǎn)因素，但是眼內(nèi)壓引起RGCs凋亡的確切機(jī)制還不清楚。有研究表明遺傳因素在青光眼的發(fā)病中起著重要的作用。OPTN基因是POAG確定的兩個致病基因之一，研究證實(shí)其在細(xì)胞存活和凋亡中起到調(diào)控作用。本實(shí)驗(yàn)對RGC5(Retin

4、alganglioncell5)進(jìn)行加壓培養(yǎng)，通過對不同壓力培養(yǎng)條件下視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的生長存活率、凋亡情況及OPTN基因表達(dá)等指標(biāo)的觀察，分析不同壓力培養(yǎng)條件下RGC5細(xì)胞的活性和總體存活狀態(tài)，從而初步探討壓力對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的直接作用及影響。方法對傳代培養(yǎng)的RGC5分別給予0、20、40、60、80mmHg壓力48dx時，應(yīng)用MTT方法和流式細(xì)胞學(xué)檢測方法檢測壓力對RGC5細(xì)胞存活率和凋亡的影響。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法、QRealt

5、imePCR和WesternBlot的方法檢測壓力作用下培養(yǎng)的RGC5細(xì)胞OPTN基因的表達(dá)量。統(tǒng)計(jì)結(jié)果均以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組間的比較用配對t檢驗(yàn)分析方法，均用SPSSl30軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。多士甲當(dāng)日7卜1、培養(yǎng)的RGC5細(xì)胞呈梭型，平均分裂時間為23天左右，細(xì)胞生長旺盛。2、M訂和流式檢測結(jié)果顯示在加壓處理48dx時后RGC5存活率隨著壓力的增高逐漸下降，各組間差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001)；RGC5細(xì)胞凋亡率不斷增高，在4