大劑量激素對(duì)兔股骨頭內(nèi)血管影響的研究.pdf

1、目的：觀察單純大劑量糖皮質(zhì)激素對(duì)動(dòng)物股骨頭關(guān)節(jié)軟骨下組織細(xì)胞及其血管影響的病理學(xué)變化，探討早期激素性股骨頭缺血性壞死(Steroid-inducedavascular necrosis of the femoral head SANFH)的發(fā)病機(jī)制。 方法：將24只12～18月齡健康日本大耳白兔(雌雄不限，體重3.0～4.2 Kg)隨機(jī)分成三組。實(shí)驗(yàn)組A(n=9)：耳緣靜脈單純注射甲基強(qiáng)的松龍，初始劑量30mg/kg，追加劑量為

2、5.4 mg/kg/h，連續(xù)23 h；實(shí)驗(yàn)組B(n=9)：耳緣靜脈注射甲基強(qiáng)的松龍8 mg/kg/d，連續(xù)10 d；對(duì)照組C(n=6)：不做任何處理。在應(yīng)用激素后2、4、6周分別對(duì)實(shí)驗(yàn)組(A、B組各3只)和對(duì)照組(2只)動(dòng)物股骨頭行明膠墨汁灌注大體觀察、冰凍切片、HE染色以及血管內(nèi)皮細(xì)胞CD34免疫組織化學(xué)染色等方法來觀察股骨頭關(guān)節(jié)軟骨下細(xì)胞(骨細(xì)胞、骨髓造血細(xì)胞、脂肪細(xì)胞)的改變，血管的形態(tài)、分布和數(shù)目的變化；采用圖像分析測定關(guān)節(jié)軟骨

3、下微血管內(nèi)徑與單位面積內(nèi)微血管的密度。 結(jié)果： ①明膠墨汁灌注顯示：正常對(duì)照組股骨頭關(guān)節(jié)軟骨下區(qū)域可見充滿墨汁的黑色微血管，周圍邊緣為骨小梁結(jié)構(gòu)；關(guān)節(jié)軟骨下終末血管與迂曲拱形的毛細(xì)血管相連，微血管網(wǎng)豐富、清晰，形態(tài)完整，可見小分支，呈珊瑚樣或短線樣分布。實(shí)驗(yàn)組A、B應(yīng)用激素6周后均有不同程度的血管邊緣不清，灌注不全面；關(guān)節(jié)軟骨下區(qū)域可見微血管數(shù)量明顯減少，呈現(xiàn)少量點(diǎn)狀或短線樣分布，未見明顯的局部墨汁灌注缺失區(qū)域，左右側(cè)股

4、骨頭內(nèi)血管灌注沒有明顯差別。 ②HE染色顯示：正常對(duì)照組股骨頭關(guān)節(jié)軟骨下細(xì)胞排列整齊，骨小梁完整，排列規(guī)則，空虛骨陷窩少見；骨小梁中的骨細(xì)胞清晰可見，核較大，位于中央；關(guān)節(jié)軟骨下血管豐富，血管壁結(jié)構(gòu)完整，血管內(nèi)未見明顯栓塞或出血現(xiàn)象，髓腔內(nèi)造血細(xì)胞豐富。實(shí)驗(yàn)組A、B應(yīng)用激素4周后，部分骨小梁變細(xì)、結(jié)構(gòu)欠規(guī)則，甚至出現(xiàn)斷裂現(xiàn)象；骨小梁中骨細(xì)胞部分出現(xiàn)核固縮、邊聚或消失，可見空虛骨陷窩增多；關(guān)節(jié)軟骨下血管數(shù)量明顯減少，部分呈裂隙狀、

5、分支狀，血管壁結(jié)構(gòu)欠完整，血管腔內(nèi)有少量紅細(xì)胞，部分微血管內(nèi)出現(xiàn)紅色血栓；髓腔內(nèi)造血細(xì)胞顯著減少。 ③免疫組織化學(xué)顯示：采用CD34單克隆抗體染色標(biāo)記股骨頭關(guān)節(jié)軟骨下血管內(nèi)皮細(xì)胞呈棕黃色為陽性染色，正常對(duì)照組可見關(guān)節(jié)軟骨下血管分布較均勻，管腔粗細(xì)大體一致，血管壁結(jié)構(gòu)完整，內(nèi)皮細(xì)胞豐富。實(shí)驗(yàn)組A、B應(yīng)用激素4周后，關(guān)節(jié)軟骨下可見血管分布較稀疏，管腔未見明顯狹窄，部分血管壁結(jié)構(gòu)欠規(guī)則，管壁略顯增厚；圖像分析示各組關(guān)節(jié)軟骨下血管管腔無

6、明顯狹窄，實(shí)驗(yàn)組A、B應(yīng)用激素后單位面積內(nèi)微血管密度明顯降低。 結(jié)論： ①應(yīng)用明膠-甲醛墨汁灌注方法標(biāo)識(shí)股骨頭內(nèi)血管，可見微血管的形態(tài)完整、清晰，此方法簡便易行，是顯示骨內(nèi)血管形態(tài)學(xué)的有效方法之一。 ②激素本身可以引起血管內(nèi)皮的損傷，抑制股骨頭內(nèi)毛細(xì)血管生長和再生，導(dǎo)致股骨頭內(nèi)MVD降低。 ③大劑量激素可以引起股骨頭內(nèi)骨細(xì)胞變性壞死，髓腔內(nèi)脂肪細(xì)胞肥大，造血細(xì)胞減少；股骨頭內(nèi)血管數(shù)量減少，密度降低，管壁結(jié)