糖調(diào)節(jié)受損大鼠腦組織炎癥因子TNF-α、IL-6的表達及其與認知功能障礙的相關(guān)研究.pdf

1、目的：
　　本研究通過高脂高糖飼養(yǎng)法建立糖調(diào)節(jié)受損大鼠模型，通過水迷宮方法檢測不同時間點大鼠認知功能情況，并應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測不同時間點大鼠腦組織炎性通路中關(guān)鍵因子TNF-α、IL-6的表達情況，通過t檢驗大鼠認知功能與大鼠腦組織中炎性因子表達的關(guān)系，以求探討糖調(diào)節(jié)受損大鼠腦組織TNF-α、IL-6因子的表達與認知功能的關(guān)系，進一步探討闡述糖調(diào)節(jié)受損對大鼠認知功能影響機制。
　　方法：
　　將隨機選取的體重為18

2、0-200g的健康雄性Wistar大鼠隨機分為A、B兩組，每組30只，A組大鼠使用的高脂高糖飼料由標(biāo)準鼠飼料加蔗糖、煉豬油和蛋黃按比搭配制作:其比例為豬油18％，蔗糖20％，蛋黃3％，基礎(chǔ)飼料59％。B組大鼠只用標(biāo)準飼料喂養(yǎng)。兩組大鼠分開喂養(yǎng)2周后測定大鼠血糖情況。A組大鼠試驗前隔夜禁食、不禁水。試驗時，將50％葡萄糖2 g/kg注入胃管，采集鼠尾靜脈血15μL，檢測各組空腹血糖(FPG)、2h后血糖(2 h PG);采用Elena建議

3、的糖尿病判斷標(biāo)準:空腹血糖大于7.0mmol/L或餐后2h血糖大于11.1mmol/L診斷為DM，具備兩者之一診斷為糖調(diào)節(jié)受損，入A組。B組大鼠采用上述方法取空腹血糖＜6.7mmol/L且2h后血糖＜11.1 mmol/L入組。兩組大鼠在第3W，6W，9W，12 W，15 W時間點分別采用Morris水迷宮實驗評估大鼠認知功能，獲得性訓(xùn)練后評估空間記憶能力，對位訓(xùn)練后評估工作記憶能力。分別在第3W，6W，9W，12W，15W時間點麻醉、

4、開胸、灌洗后端頭取腦，從視交叉向后連續(xù)切成厚約2mm冠狀切片，用免疫組化染色方法測定TNF-α、IL-6水平。采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，以均數(shù)±標(biāo)準差((X)±S)表示，兩組數(shù)據(jù)比較計數(shù)資料采用t檢查，結(jié)果P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)果：
　　空間記憶能力測定:對照組無空間記憶能力缺損，測試結(jié)果正常;糖調(diào)節(jié)受損模型組，空間記憶能力測定明顯降低。
　　工作記憶能力測定:對照組無工作記憶能力缺損，測試結(jié)果

5、正常;糖調(diào)節(jié)受損模型組，工作記憶能力測定明顯降低。
　　TNF-α的免疫組化測定:糖調(diào)節(jié)受損模型組各時點TNF-α均有較多表達;與對照組比較，糖調(diào)節(jié)受損模型組各時點表達均高于對照組（P＜0.05）。
　　IL-6因子免疫組化測定:糖調(diào)節(jié)受損模型組各時點IL-6均有較多表達;與對照組比較，糖調(diào)節(jié)受損模型組各時點表達均高于對照組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、糖調(diào)節(jié)受損大鼠組織炎性因子表達水平高于正常對照組，