大鼠潘氏細(xì)胞合成SC的發(fā)現(xiàn)和SC含量與腸道菌群移位相關(guān)性的探討.pdf

1、目的:在腸道粘膜免疫中,分泌型IgA(sIgA)起著至關(guān)重要的作用.分泌成分(SC)作為一種糖蛋白,不僅是sIgA的重要組成成分,而且是IgA的特異性受體,可與IgA結(jié)合并將其轉(zhuǎn)運(yùn)至外分泌液中去.該研究在免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn):大鼠小腸SC陽性染色局限于腸隱窩底部某些細(xì)胞,初步判斷可能是潘氏細(xì)胞.曾有文獻(xiàn)報道大鼠潘氏細(xì)胞含IgA,但目前國內(nèi)外尚沒有關(guān)于潘氏細(xì)胞含SC的報道.該課題擬通過研究SC在大鼠小腸潘氏細(xì)胞的定位,明確潘氏細(xì)胞合

2、成SC的新發(fā)現(xiàn),并探討潘氏細(xì)胞與sIgA之間的關(guān)系.有文獻(xiàn)報道長時間睡眠剝奪可引起腸道菌群移位,該研究擬觀察72h睡眠剝奪時大鼠潘氏細(xì)胞內(nèi)SC含量的變化,探討其與腸道菌群移位之間的相關(guān)性,并為潘氏細(xì)胞合成SC的發(fā)現(xiàn)進(jìn)一步提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).方法:取10只健康雄性SD大鼠,進(jìn)行心臟灌流(4％多聚甲醛)后,分別取空腸和回腸組織.組織塊常規(guī)石蠟包埋,并分別進(jìn)行常規(guī)HE染色、溶菌酶免疫組織化學(xué)染色,根據(jù)細(xì)胞的特征辨認(rèn)潘氏細(xì)胞;用SP法與兩步法分別進(jìn)行

3、SC免疫組織化學(xué)染色并復(fù)染,進(jìn)行小腸SC的細(xì)胞定位;用SP法進(jìn)行IgA免疫組織化學(xué)染色并復(fù)染,觀察潘氏細(xì)胞與IgA的關(guān)系.取2只健康雄性SD大鼠的回腸組織,通過包埋后免疫電鏡方法觀察SC在潘氏細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的定位,判斷潘氏細(xì)胞內(nèi)SC的來源與分布.取24只健康雄性SD大鼠分為實(shí)驗(yàn)組和對照組,給予實(shí)驗(yàn)組72h睡眠剝奪處理.進(jìn)行心臟灌流(4%多聚甲醛)后取回腸組織,透射電鏡觀察回腸粘膜的超微結(jié)構(gòu),免疫組織化學(xué)方法檢測SC陽性腸隱窩的數(shù)目.結(jié)論: