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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
輪狀病毒感染小鼠的機(jī)制及產(chǎn)生腹瀉的發(fā)病原因還未得到明確證實(shí)。建立成功的乳鼠感染輪狀病毒腹瀉模型,在此基礎(chǔ)上研究七味白術(shù)散對(duì)感染輪狀病毒乳鼠免疫功能的調(diào)節(jié),對(duì)小腸粘膜的生物屏障、機(jī)械屏障和免疫屏障功能的影響,輪狀病毒的清除率及乳鼠臨床癥狀的改善。同時(shí),研究七味白術(shù)散對(duì)輪狀病毒SA-11株在MA104細(xì)胞上復(fù)制的影響。
材料與方法:
輪狀病毒在MA104細(xì)胞上培養(yǎng)和傳代,提高病毒毒力,采用熒光灶試驗(yàn)檢測(cè)
2、病毒滴度。將5日齡的Balb/c乳鼠接種滴度為4.5×107FFU/mL的輪狀病毒50μ L,建立腹瀉模型。設(shè)立正常對(duì)照組,感染后分模型組、七味白術(shù)散組和病毒唑組,經(jīng)口灌胃給藥,連續(xù)5日,測(cè)定血清中IFN-γ、sIgA和小腸粘液中sIgA的含量,觀(guān)察乳鼠的腹瀉情況和體重變化,ELISA檢測(cè)糞便中RV抗原,判斷其對(duì)病毒的清除率。做石蠟切片用HE染色觀(guān)察小腸絨毛病理變化。采用MTT和CPE的實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)七味白術(shù)散對(duì)輪狀病毒SA-11在MA1
3、04細(xì)胞上復(fù)制的作用。
結(jié)果:
輪狀病毒感染乳鼠的腹瀉率和腹瀉天數(shù)降低,糞便中RV抗原檢測(cè)陽(yáng)性,證明輪狀病毒感染乳鼠模型的成功建立。熒光灶試驗(yàn)方法能相對(duì)準(zhǔn)確的測(cè)定病毒滴度。七味白術(shù)散能增加感染輪狀病毒乳鼠血清中IFN-γ、sIgA和小腸粘液中SIgA的含量,增強(qiáng)其免疫功能,減輕小鼠小腸絨毛的病理改變,恢復(fù)其屏障功能。有效緩解輪狀病毒感染乳鼠腹瀉、脫水癥狀,加快病毒從小腸的清除,降低腹瀉率、減少腹瀉天數(shù)。
七
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