大蒜素誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的小鼠淋巴瘤EL4細(xì)胞凋亡的研究.pdf

1、大蒜在人們的日常生活和醫(yī)療保健中扮演著重要作用。大蒜素是大蒜榨取物中的一種具有生物活性的有機(jī)硫化物，對(duì)各種疾病例如心臟病、心腦血管病、關(guān)節(jié)炎、肺病、痢疾、微生物感染等具有很好的治療作用。此外，大量的流行病學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)，大蒜素具有非常有效的抗腫瘤作用和比較輕微的細(xì)胞毒性，其中最吸引人的地方是它的促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用。大蒜素能誘導(dǎo)細(xì)胞DNA的降解，細(xì)胞質(zhì)空泡化，Caspase蛋白酶的激活和細(xì)胞膜膨脹裂解等細(xì)胞凋亡的典型特征。

2、因此，弄清大蒜素誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的具體機(jī)制具有非常重要的理論和臨床意義。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄看笏馑貙?duì)體外培養(yǎng)的EL4細(xì)胞的增殖和凋亡的作用，并初步探討其誘導(dǎo)凋亡的分子機(jī)制。 方法：我們采用臺(tái)盼藍(lán)拒染法測(cè)定細(xì)胞的密度和細(xì)胞的凋亡率；使用Hoechst 33258熒光染料染色，熒光顯微鏡下拍照檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)胞核的形態(tài)；采用TNUEL試劑盒檢測(cè)DNA的降解情況；Rhodamine123用于檢測(cè)線粒體膜電位的變化。為了研究細(xì)胞凋亡的

3、信號(hào)途徑，我們采用組織細(xì)胞化學(xué)法(IHC)測(cè)定凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2，細(xì)胞色素C、Caspase-3、-12的表達(dá)情況。 結(jié)果顯示：大蒜素能有效的抑制體外培養(yǎng)的EL4細(xì)胞的增殖，并誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡，具有顯著的劑量和時(shí)間依賴效應(yīng)。大蒜素處理后，EL4細(xì)胞出現(xiàn)典型的凋亡特征：DNA降解、細(xì)胞核固縮，最后凋亡小體形成；同時(shí)大蒜素促使線粒體膜電位迅速下降、Bax-Bcl-2比率增大，導(dǎo)致細(xì)胞色素C釋放到胞質(zhì)中，激活Caspase-

4、3；另外，大蒜素可以上調(diào)Caspase-12的表達(dá)，說明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與了細(xì)胞的凋亡。 結(jié)論：大蒜素能濃度-時(shí)間依賴地抑制ELA細(xì)胞的增殖、促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。其抗腫瘤機(jī)制在于大蒜素能引起線粒體通透性增加，改變Bax-Bcl-2蛋白相對(duì)表達(dá)量，降低EL4細(xì)胞線粒體膜電位，細(xì)胞色素C釋放入胞質(zhì)，并且激活了Caspase的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，啟動(dòng)細(xì)胞凋亡。同時(shí)，Caspas-12被激活，說明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可能參與凋亡的過程，但其詳細(xì)的分子機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究。