溶血磷脂酸、煙酸、沒食子酸的提取分離與檢測技術的研究.pdf

1、本文優(yōu)化了溶血磷脂酸的提取方法,建立了薄層色譜分離—磷鉬藍分光光度法測定血漿中溶血磷脂酸的含量,離子液相色譜法測定溶血磷脂酸的含量,甲酯化衍生-氣相色譜質譜聯(lián)用測定溶血磷脂酸含量,并應用于臨床實踐,得到了滿意的結果;采用優(yōu)化的實驗條件從煙酸藥片中提取煙酸,經(jīng)衍生化后用氣相色譜-質譜聯(lián)用儀進行檢測。確定了藏青果中提取沒食子酸的最佳提取工藝,建立了測定沒食子酸的新方法。
　　1.薄層色譜分離—磷鉬藍分光光度法測定血漿中溶血磷脂酸的含量

2、
　　建立一種簡便、準確、實用的測定血漿中溶血磷脂酸含量的方法,以研究腦血管疾病與溶血磷脂酸之間的相關性。采用一步法提取、薄層色譜法分離純化溶血磷脂酸,試樣經(jīng)消化處理后用磷鉬藍分光光度法檢測。利用薄層色譜可以使溶血磷脂酸與其它磷脂成分得到很好的分離,磷鉬藍分光光度法的線性范圍為0~0.90 mg·L-1,線性相關系數(shù)為0.999,檢出限為2.00μg·L-1,RSD為0.63％,加標回收率為97.3%~102.2%。對短暫性腦缺血

3、發(fā)作(TIA)患者、腦梗死患者及健康人血清中的溶血磷脂酸含量進行了測定,結果表明:短暫性腦缺血發(fā)作患者、腦梗死者血漿中的溶血磷脂酸含量明顯高于正常對照組,短暫性腦缺血發(fā)作患者血漿中溶血磷脂酸水平明顯高于腦梗死者。該法不需要特殊的儀器,昂貴的試劑,操作簡便易行,適用于常規(guī)分析。
　　2.氣相色譜-質譜聯(lián)用法測定血漿中溶血磷脂酸的含量
　　本實驗建立了從血漿中提取分離LPA的新方法,簡化了提取分離步驟,優(yōu)化了提取分離條件,采用多

4、步提取分離法提取。先水解再甲酯化,然后經(jīng)氣相色譜-質譜聯(lián)用儀檢測。此方法在0.5μg·mL-1~10μg·mL-1的范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關系,并分別得到各種脂肪酸甲酯的標準曲線方程,相關系數(shù)在0.998左右,檢出限也較低,加標回收率在87%~92%之間。取得了令人滿意的結果。
　　3.離子液相色譜法測定血清中溶血磷脂酸的含量
　　本實驗建立了高效、快速、靈敏的分析測定血清中溶血磷脂酸的方法,研究并具體優(yōu)化了提取條件的選擇,淋

5、洗液濃度的選擇等影響方法的各種因素,確立了新建方法的最佳條件。將新建方法用于臨床上子宮肌瘤患者、惡性腫瘤患者的血清樣本的分析,取得了令人滿意的效果。
　　4.硅烷衍生化氣相色譜-質譜聯(lián)用測定煙酸
　　提出了一種用氣相色譜-質譜聯(lián)用測定煙酸含量的方法。以市售煙酸片為研究對象,樣品超聲提取,提取物經(jīng)硅烷衍生化,用氣相色譜-質譜聯(lián)用儀檢測。本實驗采用六甲基二硅胺烷和三甲基氯硅烷作為硅烷化試劑,有效地去除了基質帶來的干擾,解決了煙酸

6、不容易被汽化的問題。選取苯甲酸乙酯作為內(nèi)標物定量測定,該方法在待測組分濃度為0~1g·L-1范圍內(nèi)與待測組分和內(nèi)標物的峰面積之比呈良好的線性關系,檢出限為4.54mg L-1,回收率在94.0%~98.0%之間,相對標準偏差為2.41%。結果表明,該方法操作簡便快速,靈敏度好,準確度高,可作為測定煙酸含量的方法。
　　5.氣相色譜-質譜聯(lián)用測定藏青果中沒食子酸的含量
　　首先,優(yōu)化了從藏青果中提取沒食子酸的實驗條件。在單因素