野百合堿致肺動(dòng)脈高壓大鼠的TRPC1介導(dǎo)肺動(dòng)脈收縮的時(shí)間曲線和TRPV4介導(dǎo)效應(yīng)的研究.pdf

1、目的：研究規(guī)范性瞬時(shí)感受器電位亞型1(transient receptor potential，canonicalsubfamily member1，TRPC1)和香草酸相關(guān)的瞬時(shí)感受器電位亞型4(transientreceptor potential，vanilloid-related subfamily member4，TRPV4)在野百合堿誘發(fā)肺動(dòng)脈高壓大鼠模型上對(duì)肺動(dòng)脈功能的調(diào)控作用，及其病理生理學(xué)意義。
　　 方法：S

2、D大鼠以2％MCT按照60 mg/kg劑量一次性腹腔注射，建立MCT誘導(dǎo)的大鼠慢性肺動(dòng)脈高壓模型，測(cè)定以下指標(biāo)：①平均右心室內(nèi)壓(mean rightventricular pressure，mRVP)；②右心室收縮壓(right ventricular systolic pressure，RVSP)③體循環(huán)動(dòng)脈壓(systemic arterial pressure，SAP)④右心室重量指數(shù)(RVMI=右心室重量(RV)/左心室重量(

3、LV)+室間隔(S)×100％)；⑤HE染色觀察肺動(dòng)脈結(jié)構(gòu)重建，分別計(jì)算直徑為50～100μm和101～150μm的肺內(nèi)小動(dòng)脈管腔面積(cross-sectional area，CA)與動(dòng)脈總面積(total area，TA)的比值，以及肺內(nèi)小動(dòng)脈管壁厚度(wall，W)與動(dòng)脈半徑(radius，R)的比值；⑥環(huán)匹阿尼酸(cyclopiazonicacid，CPA)誘導(dǎo)離體肺動(dòng)脈環(huán)(PAs)收縮效應(yīng)的時(shí)間曲線；⑦TRPV4激動(dòng)劑4α-佛

4、波醇-12，13-二癸酸(4α-phorbol12，13-didecanoate，4α-PDD)誘導(dǎo)離體肺動(dòng)脈環(huán)張力的量效曲線；⑧4α-PDD誘導(dǎo)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(pulmonary arterysmooth muscle cells，PASMCs)胞漿游離Ca2+濃度([Ca2+]i)反應(yīng)。
　　 結(jié)果：①與正常對(duì)照組(CON組)相比，MCT組的mRVP、RVSP和RVMI均明顯增高(P＜0.01)；②MCT組HE染色可見(jiàn)

5、肺小動(dòng)脈平滑肌層明顯增厚，管腔減小。不同直徑的肺內(nèi)小動(dòng)脈管腔面積與動(dòng)脈總面積的比值，以及肺內(nèi)小動(dòng)脈管壁厚度與動(dòng)脈半徑的比值與CON組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；③MCT組，環(huán)匹阿尼酸(CPA)引起的肺動(dòng)脈環(huán)收縮效應(yīng)也顯著增強(qiáng)(P＜0.01)，其時(shí)間曲線表現(xiàn)為MCT預(yù)處理第3d時(shí)，肺動(dòng)脈環(huán)的收縮效應(yīng)即較CON組增強(qiáng)了約1.5倍(P＜0.01)，至第5d時(shí)的收縮效應(yīng)繼續(xù)升高至CON組的5倍(P＜0.01)，隨后維持在較高水平，至MC

6、T組第14d時(shí)達(dá)最大值約為CON組的7倍(P＜0.01)，第21d時(shí)仍維持約為CON組的7.5倍水平(P＜0.01)。④MCT組，4α-PDD可引起肺動(dòng)脈環(huán)呈劑量依賴(lài)性舒張作用(1 nmol/L～3μmol/L)，且在濃度為1μmol/L和3μmol/L時(shí)，舒張作用分別為-9.12％±1.58％(P＜0.01)和-10.08％±1.61％(P＜0.01)。⑤1μmol/L的4α-PDD可引起的肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的Fluo-3熒光信號(hào)比值(

7、ratio)則由CON組0.53±0.21顯著升高至MCT組的1.69±0.96(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：①M(fèi)CT預(yù)處理3w，可誘導(dǎo)SD大鼠產(chǎn)生肺動(dòng)脈高壓，并誘發(fā)肺血管及右心室重構(gòu)。且在肺動(dòng)脈高壓的病理情況下，不同管徑動(dòng)脈的中膜平滑肌細(xì)胞是呈均勻增生、增厚的；②在MCT預(yù)處理1w內(nèi)，即顯著增強(qiáng)了TRPC1/SOCC所介導(dǎo)的血管收縮功能；③MCT預(yù)處理3w，可增強(qiáng)4α-PDD/TRPV4誘發(fā)肺動(dòng)脈環(huán)呈劑量依賴(lài)性舒張作用，但4