法舒地爾對野百合堿誘導(dǎo)兔肺動脈高壓的影響.pdf

1、目的:肺動脈高壓(pulmonary hypertension,PH)是一種以肺小動脈的痙攣、內(nèi)膜細(xì)胞增生和血管壁重構(gòu)等病理改變?yōu)橹饕卣鞯募膊　Ｑ苁湛s、血管壁重構(gòu)以及原位血栓的生成是PH形成的3個基本因素,三者的共同作用可以使得肺血管阻力進(jìn)行性升高,最終會引起右心衰竭,甚至死亡。目前治療PH的藥物主要有前列環(huán)素類、內(nèi)皮素受體拮抗劑、磷酸二酯酶抑制劑及他汀類藥物等,但因其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,這些傳統(tǒng)藥物的治療效果又不十分理想,故開發(fā)新型、有

2、效的治療PH的藥物,已經(jīng)成為國內(nèi)外學(xué)術(shù)研究的熱點(diǎn)。法舒地爾(fasudil,六氫-1-(5-磺?；愢?-1(H)-1,4-二氮雜),作為Rho激酶抑制劑的代表,它是一種新型異喹啉磺胺的衍生物,可以通過抑制Rho激酶,抑制血管收縮,抑制血管平滑肌細(xì)胞增生,拮抗內(nèi)皮功能紊亂,抑制血管壁重構(gòu)等機(jī)制降低肺動脈壓力。本實(shí)驗(yàn)在野百合堿(monocrotaline,MCT)誘導(dǎo)兔制備PH模型的基礎(chǔ)上,選用法舒地爾對此PH模型進(jìn)行干預(yù),觀察法舒地爾

3、是否可以降低野百合堿誘導(dǎo)PH兔的肺動脈壓力,并進(jìn)一步探討其作用機(jī)制,為法舒地爾在臨床PH病人的應(yīng)用上提供理論依據(jù)。
　　 方法:選用健康新西蘭兔18只,隨機(jī)分為3組,①對照組(對照組,n=6)、②PH模型組(模型組,n=6)及③PH+法舒地爾組(治療組,n=6)。在相同的飼料及飼養(yǎng)條件下,模型組及治療組一次性給予野百合堿溶液(用無水乙醇和生理鹽水按1:5的比例混合溶解),以60mg/kg的劑量采用腹腔彈丸式注射法注入兔的腹腔,對

4、照組用同樣的方法一次性腹腔內(nèi)注射相同劑量的乙醇和生理鹽水的混合液。飼養(yǎng)4周后,開始進(jìn)行藥物干預(yù)。治療組腹腔內(nèi)注射法舒地爾15ml/kg/d(法舒地爾按2ml/kg稀釋入生理鹽水),而對照組及模型組腹腔內(nèi)注射生理鹽水15ml/kg/d,共持續(xù)4周。實(shí)驗(yàn)8周后,將兔麻醉,采用右心導(dǎo)管法測定各組平均肺動脈壓力(mPAP),測壓結(jié)束后,立即打開胸腔,完整取出心臟,剪去心房,分離右心室(RV)、左心室加室間隔(LV+IVS),并依次稱重,計算出R

5、V/(LV+IVS)的比值[即右心室肥厚指數(shù)(RVHI)],以確定有無右心室肥厚及肥厚程度。同時立即取出肺組織,放置于10％甲醛液中,固定72小時,經(jīng)石蠟包埋,然后切片,進(jìn)行HE染色,在光鏡下觀察肺血管形態(tài)的改變并照相。此外,在實(shí)驗(yàn)開始時及第4周、第8周時分別從各組兔耳緣靜脈抽血,采用硝酸還原酶法及放射免疫法分別測出血漿中NO及ET-1的值。
　　 結(jié)果:
　　 1.兔一般情況的觀察:模型組及治療組的兔在腹腔內(nèi)注射野百合

6、堿后第七天開始,出現(xiàn)毛色晦暗,呼吸急促,進(jìn)食量減少,體重較對照組增加緩慢等現(xiàn)象,而對照組的兔則活動自如,毛色有光澤,呼吸平穩(wěn)。4周之后治療組開始應(yīng)用法舒地爾后,出現(xiàn)呼吸急促的癥狀較前逐漸好轉(zhuǎn),毛色略有光澤,進(jìn)食量及體重也較前有所增加。
　　 2。肺動脈平均壓(mPAP)的比較:對照組、模型組、治療組的mPAP水平分別為:(15.15±1.35)mmHg、(40.48±1.75)mmHg、(27.26±2.26)mmHg,與對照組

7、相比,模型組及治療組mPAP明顯升高(P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義;與模型組相比,治療組mPAP較模型組降低(P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3.右心室肥厚指數(shù)(RVHI)的比較:對照組、模型組、治療組的RVHI水平分別為:(0.36±0.13)、(0.29±0.09)、(0.27±0.26),與對照組相比,模型組及治療組右心室肥厚指數(shù)明顯升高(P＜0.01),具有統(tǒng)計學(xué)意義;與模型組相比,治療組RVHI較模型組降低(

8、P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 4.肺組織病理學(xué)的改變:與對照組相比,注射野百合堿后的模型組及治療組兔的肺小動脈的管壁增厚,血管平滑肌組織及彈力纖維層均增殖明顯,血管管腔減小,炎性細(xì)胞浸潤,非肌型的小動脈出現(xiàn)肌化現(xiàn)象,內(nèi)膜細(xì)胞呈不均勻的增生;而治療組與模型組相比,血管壁增厚及管腔狹窄的程度減弱,炎性細(xì)胞浸潤程度減輕,彈力纖維層的增殖及非肌型小動脈的機(jī)化現(xiàn)象均有所好轉(zhuǎn)。
　　 5.NO水平的比較:在第4、8周,與對

9、照組相比,模型組及治療組的血漿NO水平降低(P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義;在第8周,與模型組相比,治療組血漿NO水平明顯升高(P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 6.ET-1水平的比較:在第4、8周,與對照組相比,模型組及治療組的血漿ET-1水平升高(P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義;在第8周,與模型組相比,治療組血漿ET-1水平明顯降低(P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論:
　　 1模型組及治療組

10、mPAP水平明顯高于對照組,而治療組mPAP較模型組降低(均P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義,表明野百合堿可以誘導(dǎo)兔產(chǎn)生PH,而法舒地爾則可以在一定程度上降低肺動脈壓力,并抑制右心室肥厚的形成與進(jìn)展。
　　 2模型組及治療組RVHI水平明顯高于對照組,而治療組RVHI較模型組降低(均P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義,表明野百合堿可以導(dǎo)致兔的右心室肥厚,而法舒地爾則可以在一定程度上抑制右心室肥厚的形成與進(jìn)展。
　　 3模型組及

11、治療組與對照組相比較,肺小動脈管壁增厚,管腔狹窄,炎性細(xì)胞浸潤,彈力纖維增生,非肌型小動脈機(jī)化,而治療組以上方面的改變程度較模型組弱。表明野百合堿可以使肺小動脈發(fā)生重構(gòu),而法舒地爾則可以在一定程度上抑制并逆轉(zhuǎn)肺小動脈重構(gòu)的進(jìn)程,從而降低肺動脈壓力。
　　 4模型組及治療組兔血漿中NO水平較對照組降低,ET-1水平較對照組升高,而治療組與模型組相比,NO水平升高,ET-1水平降低(均P＜0.05),具有統(tǒng)計學(xué)意義。表明法舒地爾可以