大黃素作用于大鼠重癥急性胰腺炎的分子機(jī)理研究.pdf

1、目的：重癥急性壞死性胰腺炎(Severe acute pancreatitis SAP)因其并發(fā)癥多、病死率高和病情的多變性，長期以來人們?yōu)榇诉M(jìn)行了大量的探索和研究。由于致病危險(xiǎn)因素的多樣性，疾病過程的復(fù)雜性，導(dǎo)致SAP的變化千差萬別，更由于發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚，治療缺少特異有效的藥物和手段。而中西醫(yī)結(jié)合治療SAP取得了較好的療效，并在這方面進(jìn)行了成功的探索，SAP經(jīng)中西醫(yī)結(jié)合治療后使其病死率從20世紀(jì)80年代的70％-85％下降到現(xiàn)在

2、約10％左右。但是由于中藥是一復(fù)方成分，要想最終成為藥品走向世界，實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化，有必要對(duì)其主要成分單體進(jìn)行SAP的治療的機(jī)理研究，并最終明確其治療SAP的藥理學(xué)基礎(chǔ)。本課題的目的以大鼠SAP為模型研究中藥一金顆粒中主藥的有效成分大黃作用的分子機(jī)理，以闡明其在中西醫(yī)結(jié)合治療SAP的作用基礎(chǔ)。 方法： (1)采用大鼠被膜下注射5％的硫磺膽酸鈉制成大鼠SAP，用一金顆粒干預(yù)后，觀察其血漿淀粉酶的改變。 (2)用不同劑

3、量的大黃素干預(yù)大鼠SAP后，觀察其藥物的隨著時(shí)間的改變，血漿中IL-1β、TNF-α、IL-8和IL-10的改變時(shí)效關(guān)系和量效關(guān)系。 (3)RT-PCR方法檢測(cè)大黃素干預(yù)后肺組織IL-1β、IL-6和IL-10表達(dá)的變化。 (4)用免疫組化的方法檢測(cè)大黃素干預(yù)大鼠實(shí)驗(yàn)性SAP后，器官肝肺小腸P-選擇素的改變，，ICE(在肺組織表達(dá)的改變。 (5)基因芯片方法分析在SAP模型下用大黃素干預(yù)后其基因表達(dá)譜的改變。 結(jié)

4、果： (1)中藥一金顆粒有很好的降低大鼠重癥急性胰腺炎的血清淀粉酶；減輕胰腺局部的炎癥(2)中藥一金顆粒的有效成分大黃素有較好的降低大鼠重癥急性胰腺炎的血清淀粉酶，能改變胰腺外器官的炎癥反應(yīng)，減輕肺組織，肝組織的充血，水腫等炎性反應(yīng)。同時(shí)降低血漿中致炎因子IL-1β、FNF-α和IL-8的濃度，而升高抑炎因子IL-10的濃度。 (3)大黃素可使大鼠SAP時(shí)肺組組織IL-10的RNA的表達(dá)增加，而IL-1β、IL-6的表達(dá)

5、降低，且有一定的時(shí)效關(guān)系。 (4)免疫組化結(jié)果顯示，大黃素給予后在大鼠SPA時(shí)肺組織的ICE表達(dá)降低，而P-選擇素在肝、肺、腸的表達(dá)也降低。 (5)基因芯片檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，給予大黃素治療大鼠SAP，用RNA進(jìn)行基因測(cè)定，發(fā)現(xiàn)其基因表達(dá)有變化的約35個(gè)基因，其中上調(diào)基因有7個(gè)，下調(diào)基因有28個(gè)，這些差異基因與細(xì)胞因子和生長因子受體、細(xì)胞凋亡、DNA損傷/修復(fù)，離子通道、信號(hào)傳導(dǎo)、轉(zhuǎn)錄/轉(zhuǎn)錄因子等密切相關(guān)。 結(jié)論：

6、 (1)中藥一金顆粒對(duì)大鼠重癥急性胰腺炎有降低其胰淀份酶的治療作用。 (2)一金顆粒的主藥大黃的主要成分大黃素可降低大鼠重癥急性胰腺炎血漿淀粉酶，并對(duì)大鼠SAP時(shí)全身炎癥的肺、肝、小腸粘膜有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與負(fù)性調(diào)節(jié)促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-8的表達(dá)，正性調(diào)節(jié)抑炎因子IL-10有關(guān)。也可能與負(fù)性調(diào)節(jié)P-選擇素在肺、腸、肝的表達(dá)有關(guān)。 (3)大黃素可減輕SAP時(shí)肺損傷癥狀，其機(jī)制與大黃素在RNA水平下調(diào)肺組