白細(xì)胞介素18在卵清蛋白誘發(fā)的小鼠哮喘模型中對嗜酸性粒細(xì)胞肺內(nèi)募集作用的研究.pdf

1、Th1/Th2型免疫應(yīng)答失衡是支氣管哮喘的主要免疫學(xué)改變。Th2型免疫應(yīng)答的增強(qiáng)及Th1型免疫應(yīng)答的減弱，是導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞增殖、活化和氣道浸潤，造成慢性氣道炎癥反應(yīng)的主要原因。因此調(diào)節(jié)Th1/Th2型免疫應(yīng)答的平衡成為目前支氣管哮喘(簡稱哮喘)治療研究的重點(diǎn)之一。 白細(xì)胞介素18(IL-18)是新近發(fā)現(xiàn)的由活化巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的強(qiáng)有力的γ干擾素誘導(dǎo)因子。研究認(rèn)為它能降低氣道高反應(yīng)性，對哮喘氣道炎癥中的嗜酸性粒細(xì)胞也有重要的調(diào)節(jié)作用

2、。使用IL-18基因敲除鼠支氣管哮喘動物模型，Kodama等發(fā)現(xiàn)IL-18對氣道黏膜免疫的誘導(dǎo)和維持具有調(diào)節(jié)作用。IL-18基因缺陷鼠肺嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量明顯高于正常鼠，提示IL-18在抑制呼吸道嗜酸性粒細(xì)胞浸潤方面具有作用。Linpei等也通過比較哮喘患者、肉樣瘤病患者及健康人之間支氣管肺泡灌洗液中IL-18的水平，發(fā)現(xiàn)低水平的IL-18可能與哮喘的氣道炎癥的發(fā)生有關(guān)。然而，Kumano等的研究則認(rèn)為IL-18在誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞向呼吸道

3、器官的募集中起促進(jìn)作用，且IL-18的水平與嗜酸性粒細(xì)胞募集呈正相關(guān)，即IL-18可能促進(jìn)和加重哮喘的氣道炎癥。由此，IL-18是否參與支氣管哮喘中嗜酸性粒細(xì)胞向肺內(nèi)的募集目前尚無定論。 白細(xì)胞介素18結(jié)合蛋白(IL-18BP)是新發(fā)現(xiàn)的一種糖蛋白，系免疫球蛋白超家族成員。IL-18BP與IL-18結(jié)合后可抑制IL-18的生物學(xué)活性。故本文使用卵清蛋白(OVA)誘發(fā)的小鼠哮喘模型，采用體內(nèi)注入IL-18BP的方法阻斷IL-18的

4、生物學(xué)活性，從而探討IL-18對嗜酸性粒細(xì)胞肺內(nèi)募集的作用，從另一角度揭示IL-18在哮喘發(fā)病中的作用機(jī)理。 實(shí)驗(yàn)材料與方法:6周齡清潔級雌性BALB/C小鼠24匹，隨機(jī)分為三組，每組8匹鼠。A組：生理鹽水對照組；B組：OVA-哮喘組；C組： IL-18BP處理組。試驗(yàn)開始第1天及第8天，B組，C組小鼠分別經(jīng)腹膜注射0.1ml含OVA 10 μg與Al(OH)3 20μg的生理鹽水混懸液，A組小鼠注射等量的生理鹽水。試驗(yàn)第21天

5、，B組，C組小鼠吸入霧化的含5﹪ OVA的生理鹽水20分鐘，連續(xù)6天至小鼠出現(xiàn)哮喘癥狀。A組吸入霧化的生理鹽水。C組小鼠于激發(fā)前經(jīng)腹膜注射IL-18BP(5μg/鼠)。于末次激發(fā)后24小時，三組小鼠頸動脈取血，收集血清，ELISA法測定外周血IL-18含量。同時收集鼠支氣管肺泡灌洗液(BALF)做細(xì)胞涂片并計(jì)數(shù)白細(xì)胞及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量。 試驗(yàn)結(jié)果: IL-18BP處理組外周血中IL-18水平明顯下降，與哮喘組相比有顯著性

6、差異。哮喘組及IL-18BP處理組BALF中白細(xì)胞數(shù)量及嗜酸性粒細(xì)胞百分比與生理鹽水對照組相比顯著升高，但二組間相比無顯著差異。 討論: 小鼠哮喘模型是用于研究人類支氣管哮喘的主要工具。本文模型的建立主要參照劉春濤等人的方法并略加改進(jìn)。 IL-18BP處理組外周血中IL-18水平明顯低于哮喘組，但高于生理鹽水對照組，說明IL-18BP對OVA誘導(dǎo)的IL-18的產(chǎn)生有一定的抑制作用。 在本實(shí)驗(yàn)中，哮喘小鼠肺