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1、[目的]本研究旨在觀察膀胱膽堿能神經(jīng)和氮能神經(jīng)的病理改變,探討脊髓脊膜膨出對膀胱平滑肌和神經(jīng)發(fā)育的影響,以便進一步研究脊髓脊膜膨出對排尿功能影響奠定基礎(chǔ)。 [方法]實驗組:將已孕8d健康昆明種小白鼠,于妊娠8d0h三次間隔6h連續(xù)灌服全反式維甲酸方法,誘導(dǎo)孕鼠產(chǎn)生的脊髓脊膜膨出畸形仔鼠;對照組:同法灌服孕鼠同劑量不含全反式維甲酸的黃豆油所產(chǎn)生的正常仔鼠。對實驗組仔鼠(n=40只),對照組仔鼠(n=40只)行以下觀察:①仔鼠大體觀
2、察;②椎管及脊髓橫斷面石蠟切片HE染色,光鏡下觀察腰骶部椎管及脊髓病理改變;⑧膀胱冰凍切片HE染色,光鏡下觀察膀胱壁及平滑肌細(xì)胞形態(tài)改變;④膀胱壁Karnovsky-Roots直接法AchE染色,觀察膽堿能神經(jīng)改變;⑤膀胱壁nNOS免疫組化二步法染色,觀察氮能神經(jīng)改變;⑥膀胱壁膽堿能神經(jīng)和氮能神經(jīng)平均光密度和積分光密度值。 [結(jié)果]1.實驗組觀察:①大體所見:腰骶部MMC發(fā)生率為60.3%,圓錐形、圓形或近三角形隆起,外觀呈淡紫
3、色或紫紅色,皮膚缺損、脊髓脊膜外露。②光鏡下所見:椎管結(jié)構(gòu)缺損、脊髓橫斷面形態(tài)及周圍組織結(jié)構(gòu)混亂,脊髓神經(jīng)元形態(tài)異常;膀胱壁變薄、厚薄不均,平滑肌細(xì)胞排列紊亂,細(xì)胞核核形態(tài)大小不等;膀胱壁膽堿能神經(jīng)纖維染色淺淡,神經(jīng)纖維細(xì)而少;膀胱壁氮能神經(jīng)染色淺淡,纖維少,分布不均。2.對照組觀察:①大體所見:仔鼠皮膚光滑完整;②光鏡下所見:椎管結(jié)構(gòu)完整、脊髓及神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)正常;膀胱壁厚薄均勻、平滑肌細(xì)胞排列規(guī)則;膀胱壁膽堿能神經(jīng)染色較深,纖維豐富;
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