雞胚性腺發(fā)育的組織形態(tài)學(xué)研究.pdf

1、由于雞的性別決定及雞胚性腺發(fā)育的分子機理不清楚，所以雞胚性腺發(fā)育過程及其分子調(diào)控成為重要的研究方向。目前關(guān)于雞胚性腺的研究已經(jīng)深入到各個方面，大部分研究集中在性腺發(fā)育的分子調(diào)控機理，然而關(guān)于雞胚胎期性腺基礎(chǔ)形態(tài)系統(tǒng)的研究則相對匱乏，僅有極少數(shù)零散的研究報道;若沒有正常時基本形態(tài)作為參照標(biāo)準(zhǔn)，很難判斷實驗操作效果，因此系統(tǒng)的研究正常狀態(tài)下性腺的基本形態(tài)顯得尤為重要。
　　有鑒于此，本研究以0.5天為間隔，采集整個孵化期不同日齡的雞胚

2、性腺，對其進(jìn)行性別鑒定分組后，借助石蠟切片和冰凍切片，利用HE染色觀察不同倍數(shù)物鏡下性腺組織的基本形態(tài)，了解雌雄性腺基本的結(jié)構(gòu)組成以及二者間的差異;利用PAS染色、SSEA-1免疫組化和c-Kit免疫組化定性追蹤生殖細(xì)胞的變化過程;利用油紅O染色、FOXD1免疫組化和SOX9免疫組化研究支持細(xì)胞的生成時間和形態(tài)變化。通過定性地分析雌雄性腺中幾種主要細(xì)胞和性腺結(jié)構(gòu)，以期能深入、系統(tǒng)地從基本組織形態(tài)水平豐富整個胚胎期性腺的狀態(tài)及其變化趨勢，

3、同時尋找雌雄性腺組織中主要細(xì)胞類型鑒定方法，并擬清幾個主要細(xì)胞分化或形成的時間，從而全方位的豐富雞性腺發(fā)育的基礎(chǔ)學(xué)，為今后對雞胚性腺的研究提供基礎(chǔ)對照。主要研究結(jié)果如下:
　　(1) HE染色低倍鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，雄性雞胚性腺，分左右兩側(cè)，且兩側(cè)均發(fā)育，但左側(cè)稍大。而雌性雞胚性腺雖也分為左右兩側(cè)，但雌性僅左側(cè)發(fā)育，呈不對稱發(fā)育。
　　(2) HE染色高倍鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，雄性性腺無皮、髓之分，含有大量管狀結(jié)構(gòu)，在胚胎期第8天清晰可見

4、;雌性有明顯的皮、髓質(zhì)，且髓質(zhì)緊靠腎的中段。在胚胎期第5.5天已清晰可見皮質(zhì)部分。髓質(zhì)部分含有大量空泡狀結(jié)構(gòu)，胚胎期第8天可見。
　　(3) PAS染色與SSEA-1免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn)原始生殖細(xì)胞系在雄性胚胎期性腺的第12.5天左右完全分化;在雌性胚胎期性腺的第11天左右完全分化。
　　(4)油紅O染色、SOX9免疫組化以及FOXD1免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn):睪丸支持細(xì)胞在胚胎期第6.5天左右開始生成。初期細(xì)胞核大，為圓形，而后分裂為