腦靈湯對阿爾茨海默病模型大鼠海馬CA3區(qū)域GFAP和IL-1β表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察腦靈湯對阿爾茨海默病模型大鼠行為學(xué)、海馬組織形態(tài)學(xué)、海馬CA3區(qū)GFAP和IL-1β蛋白表達(dá)的影響，初步探討腦靈湯對AD模型大鼠的治療作用及其可能的作用機(jī)制。 方法：將經(jīng)Y型迷宮測試篩選后入選的40只SD大鼠完全隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組、中藥組和西藥組。采用Aβ1-42注射大鼠海馬制作AD大鼠模型，Y迷宮試驗(yàn)和Morris水迷宮測定大鼠造模后三周的學(xué)習(xí)記憶成績，取腦組織作冰凍切片，剛果紅染色觀察大鼠海馬是否有β

2、-淀粉樣蛋白的沉積，HE染色、Nissl染色觀察大鼠海馬組織形態(tài)學(xué)改變。免疫組化法觀察GFAP、IL-1β在大鼠海馬CA3區(qū)組織神經(jīng)元中的表達(dá)。 結(jié)果：(1)Y迷宮實(shí)驗(yàn)中，與假手術(shù)組和正常組比較，模型組大鼠學(xué)會躲避所需的電刺激次數(shù)明顯增多(p<0.05)，與模型組比較，經(jīng)藥物干預(yù)后，中藥、西藥兩治療組大鼠表現(xiàn)為所需的電刺激次數(shù)減少(p<0.05)，且兩治療組相比無顯著性差異。(2)Morris水迷宮隱匿平臺搜索實(shí)驗(yàn)中，與假手術(shù)組

3、和正常組比較，模型組大鼠表現(xiàn)為逃避潛伏期明顯延長(p<0.05)；探索實(shí)驗(yàn)中，正常組和假手術(shù)組動物的平均穿越次數(shù)最多，中藥組和西藥組動物穿越次數(shù)又多于模型組，比較有顯著差異(p<0.05)。(3)剛果紅染色：光鏡下，正常組、假手術(shù)組大鼠海馬切片未見橘紅色淀粉樣沉積，海馬背側(cè)細(xì)胞帶排列整齊。模型組大鼠Aβ1-42注射部位的海馬切片上可見橘紅色斑塊狀淀粉樣沉積，提示海馬組織區(qū)有A B沉淀，且模型組海馬背側(cè)細(xì)胞帶明顯損傷，局部神經(jīng)元大段缺失，

4、并出現(xiàn)膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)。(4)光鏡觀察顯示，假手術(shù)組和正常組大鼠海馬CA3區(qū)錐體細(xì)胞排列緊密整齊，無明顯神經(jīng)元脫失；模型組大鼠海馬CA3區(qū)錐體細(xì)胞排列稀疏、紊亂，神經(jīng)元脫失明顯，可見膠質(zhì)細(xì)胞增生，且正常錐體細(xì)胞數(shù)目較正常組和假手術(shù)組比較明顯減少(p<0.05)；中、西藥治療組大鼠海馬CA3區(qū)神經(jīng)元脫失現(xiàn)象明顯減輕，錐體細(xì)胞形態(tài)較正常，排列較整齊，接近假手術(shù)組。(5)GFAP免疫組化結(jié)果顯示，各組大鼠海CA3區(qū)域GFAP陽性細(xì)胞數(shù)比較，模型組

5、最多，中藥組和西藥組高于正常組和假手術(shù)組(p<0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(6)IL-1β免疫組化結(jié)果顯示，各組大鼠海馬CA3區(qū)IL-1β陽性細(xì)胞數(shù)比較，模型組最多，中藥組和西藥組高于正常組和假手術(shù)組(p<0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組大鼠海馬CA3區(qū)灰度值比較，模型組顯著低于假手術(shù)組和正常組的灰度值(p<0.05)；中藥組和西藥組大鼠海馬CA3區(qū)灰度值較模型組顯著增加(p<0.05)。 結(jié)論：(1)本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明采用Aβ