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文檔簡介
1、近年來,偽狂犬病毒(Pseudorabies Virus,PRV)變異株的出現(xiàn)導致原有病毒疫苗的保護力下降,國內(nèi)豬場偽狂犬病不斷爆發(fā),對養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。本研究以PRV變異株(LY-2015)與經(jīng)典株(Halv)為研究對象,滴鼻感染成年健康昆明鼠。通過免疫組織化學染色、原位雜交染色、PCR技術結(jié)合組織病理學技術,研究病毒在小鼠腦內(nèi)的分布。同時通過不同時間點小鼠腦內(nèi)病毒的分布差異分析PRV滴鼻感染小鼠后的上行傳導通路,以填補變異
2、株PRV感染小鼠后病毒在腦內(nèi)分布相關研究的空白,并為臨床上PRV的診斷與精確的阻斷病毒傳播提供基礎資料。論文主要研究內(nèi)容如下:
1病毒感染小鼠后的臨床癥狀
在2,000TCID50的LY-2015株PRV感染組,小鼠在病毒感染48h后開始出現(xiàn)被毛粗亂、食欲不振;在病毒感染60h后,小鼠表現(xiàn)出精神振奮,抓撓頭面部皮膚;病毒感染84h后,多數(shù)小鼠因瘙癢抓撓致皮膚破潰,小鼠死亡。用相同感染量的Halv株PRV滴鼻感染小鼠時
3、,未見任何臨床癥狀。在10,000TCID50的Halv株PRV感染組,小鼠在病毒感染72h后開始出現(xiàn)與LY-2015株PRV感染組相似的臨床癥狀;在病毒感染96h后,大量小鼠死亡。結(jié)果表明LY-2015株PRV毒力較Halv株PRV強。
2病毒感染后的上行傳導通路
LY-2015株PRV感染小鼠后,病毒首先出現(xiàn)在鼻黏膜下層細胞內(nèi),然后在三叉神經(jīng)相關神經(jīng)核團、交感神經(jīng)相關神經(jīng)核團、面神經(jīng)相關神經(jīng)核團內(nèi)均檢測到PRV。
4、表明變異病毒LY-2015株PRV滴鼻感染小鼠后可沿三叉神經(jīng)、交感神經(jīng)與面神經(jīng)通路上行傳導,致中樞感染。Halv株PRV滴鼻感染小鼠后,在三又神經(jīng)相關核團、交感神經(jīng)相關核團、副交感神經(jīng)相關核團與面神經(jīng)相關核團內(nèi)檢測到PRV。說明經(jīng)典病毒Halv株PRV滴鼻感染小鼠后可沿三叉神經(jīng)、交感神經(jīng)、副交感神經(jīng)和面神經(jīng)上行傳導。
3病毒感染小鼠后在腦內(nèi)的分布
2,000TCID50的LY-2015株PRV感染小鼠后,病毒多分布于
5、脊髓,腦橋和延髓,大腦內(nèi)僅在丘腦可見少量病毒。在病毒感染84h后,小鼠腦內(nèi)的病毒分布最為廣泛。10,000TCID50的Halv株PRV感染組,病毒不僅分布于脊髓、腦橋和延髓,大腦中也存在多量病毒。病毒感染小鼠96h后在腦內(nèi)的分布最為廣泛。結(jié)果表明,經(jīng)典病毒Halv株PRV感染小鼠后沿軸突上行傳導較變異病毒LY-2015株PRV慢;且LY-2015株PRV的毒力較強,小鼠在病毒感染后過早死亡,僅少量病毒傳導至中樞,分布于下丘腦外側(cè)部、丘
6、腦下中間核腹側(cè)部等。
此外,在2,000TCID50的LY-2015株PRV感染組,小鼠在病毒感染后120h,IHC染色呈PRV陰性,但ISH染色呈PRV陽性,結(jié)果表明小鼠腦內(nèi)存在病毒基因,但病毒未復制。結(jié)果表明,感染PRV后,耐過小鼠呈隱性感染,病毒基因整合于小鼠外周神經(jīng)細胞核內(nèi),但不復制產(chǎn)生新的病毒病毒粒子。
以上結(jié)果表明,LY-2015株PRV毒力強于Halv株PRV;Halv株PRV只有在高病毒滴度下才能造成
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