EGF對Ezrin在SKOV3細胞中表達的影響及Ezrin和EGFR在人卵巢上皮性腫瘤中的表達分析.pdf

1、目的： 探討在EGF和gerlistein作用下人卵巢癌SKOV3細胞增殖及Ezrin表達的情況，分析EGFR及Ezrin在人卵巢上皮性腫瘤中的表達意義及與預后的關系。 材料和方法： 1、采用體外細胞培養(yǎng)的方法，用MT3、法比較不同濃度的EGF及genistein作用下，人卵巢癌細胞株SKOV3的生長、增殖變化；間接免疫熒光技術檢測在EGF作用下Ezrin在SKOV3細胞的分布；半定量RT-PCR檢測SKOV3細

2、胞在不同濃度的EGF及genistein作用下Ezrin表達的變化。 2、選取1993年1月至2005年5月本教研室有堅持隨訪資料的卵巢上皮性腫瘤93例，其中良性11例、交界性9例、惡性70例，并隨機選取正常卵巢組織7例，制作組織芯片，應用免疫組織化學技術檢測Ezrin及EGFR的表達。 結果： 1、在較低濃度的EGF(0.1，lng/ml)作用下，SKOV3細胞增殖率呈增加趨勢并與EGF濃度正相關(p<0.00

3、01)；在較高濃度的EGF(10，100rlg/ml)作用下，細胞增殖率與EGF濃度無關(p>0.05)；隨EGF'作用時間的延長，細胞增殖率增加(p<0.05)。在genistein作用下，SKOV3細胞存活率隨濃度的增加呈下降趨勢，并與genistein濃度負相關(p<0.0001)；相同濃度下，隨getIistein作用時間的延長，細胞存活率增加(p<0.05)。EGF與gerlistein同時作用于SKOV3細胞與單獨應用gen

4、istein相比，細胞存活率增加(p<0.05)。 2、間接免疫熒光技術檢測顯示，Ezrin在SKOV3細胞中分布于胞漿及胞膜，在EGF作用下SKOV3細胞伸出偽足，胞體伸長，Ezrin向胞膜移位、聚集。 3、半定量PT-PCR結果顯示，在較低濃度(0.01、lng/ml)時，EGF濃度與EzrinmRNA表達正相關(p<0.05)。EGF與genistein同時作用組與getlistein單獨作用組相比，Ezrin m

5、RNA表達增加(p<0.05)。 4、EGFR表達的陽性率及RS評分從正常卵巢組織、良性卵巢上皮性腫瘤、交界性卵巢上皮腫瘤到卵巢癌呈上升趨勢。正常卵巢與良性卵巢上皮腫瘤、交界性卵巢上皮腫瘤、卵巢癌之間的表達均存在顯著差異(p<0.05)。EGFR的表達與EGF對Ezrin在SKOV3細胞中表達的影響及Ezrin和EGFR在人卵巢上皮性腫瘤中的表達分析手術分期及有無遠處轉移呈正相關(p<0.05)，但與年齡、組織學分級及有無淋巴結

6、轉移無關。在單因素及Cox多因素生存分析中顯示，EGFR的表達與卵巢上皮性腫瘤病人的累積生存率有關，EGFR陰性病人相對危險度比EGFR陽性病人低(多因素Cox，p<0.05)，預后好。 5、Ezrin表達的陽性率及RS評分從正常卵巢組織、良性卵巢上皮性腫瘤、交界性卵巢上皮腫瘤到卵巢癌呈遞減趨勢，在良性卵巢上皮性腫瘤與卵巢癌中的表達存在顯著差異(p<0.05)。Ezrin的表達與組織學分級、手術分期呈負相關(p<0.05)。在E

7、zrin表達與卵巢上皮性腫瘤患者的生存分析顯示，Ezrin的表達與卵巢上皮性腫瘤病人的累積生存率有關(p<0.05)。Ezrin表達陰性病人累積生存率比Ezrin表達陽性病人低，預后差。但在COX多因素生存分析中，Ezrin表達強度對卵巢上皮性腫瘤病人的生存無獨立的影響。 6、相關分析顯示，Ezrin的表達與EGFR無明顯的相關性(p>0.05)。 結論： 1、體外細胞培養(yǎng)的方法研究表明，EGF能促進人卵巢癌SK

8、OV3細胞的增殖，上調SKOV3細胞中Ezrin的表達。getlistein能拮抗這種作用。EGF能影響Ezrin在SKOV3細胞中分布。 2、EGFR可能是卵巢上皮腫瘤發(fā)生的相關基因，其表達與腫瘤的發(fā)展及轉移有關。EGFR陽性病人預后較差，EGFR可作為卵巢上皮性腫瘤預后不良的指標。 3、本研究佐證了Ezrin參與卵巢上皮性腫瘤轉移。但Kaplan-Meier法及COX單因素生存分析顯示，卵巢上皮性腫瘤中Ezrin表達