降鈣素和反義核酸抑制乳腺癌細(xì)胞的體內(nèi)外作用研究.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文降鈣素和反義核酸抑制乳腺癌細(xì)胞的體內(nèi)外作用研究姓名：趙麗申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：曹英林2002.5.16山東大學(xué)碩士學(xué)位論文一========================_h1R的aoDN在體外作用于乳腺癌細(xì)胞系McF7和肝癌細(xì)胞系BEL7402，觀察其對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、端粒酶活性、凋亡及細(xì)胞周期的影響，研究端粒酶反義、|核酸的抑癌作用。，，目的：體外實(shí)驗(yàn)研究sCT的抑癌機(jī)理。建立乳腺癌荷瘤裸鼠模型，觀

2、察sCT的體內(nèi)抑癌作用和對(duì)骨代謝的影響。研究端粒酶反義核酸的抑癌作用，探索aODN發(fā)揮作用的理想構(gòu)型和濃度，觀察端粒酶與凋亡的關(guān)系。f方法：Ii1降鈣素體外抑癌作用的研究：體外培養(yǎng)人乳腺癌細(xì)胞系T47D和MCF07，細(xì)胞計(jì)數(shù)、MTT法觀察細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率；提取細(xì)胞內(nèi)RNA，透射電鏡(Wansmissionelectronmicroscope，TEM)和DNA電泳觀察細(xì)胞凋亡，流式細(xì)胞儀比較細(xì)胞周期和凋亡率改變，以RTPCR和ELISA法分

3、析細(xì)胞端粒酶活眭。2降鈣素體內(nèi)抑癌作用的研究；選擇6周齡的雌性裸鼠，皮下接種乳腺癌細(xì)胞系MCF7細(xì)胞。因?yàn)槿橄侔┘?xì)胞系為雌激素依賴性生長(zhǎng)，給裸鼠肌注雌激素并在同—部位兩次接種以提高成瘤率，建立乳腺癌荷瘤動(dòng)物模型。隔日肌注不同劑量的sCT(004p_g、0299、l瞻)，對(duì)照組注射等體積注射用水。20d后分離瘤體測(cè)Jl中Nk4，測(cè)血鈣和血清堿性磷酸酶水平。掃描電鏡(scanningelectronmicroscope，SEM)觀察裸鼠第三