2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、該文工作以胃癌細(xì)胞BGC-823為材料,運(yùn)用分子細(xì)胞生物學(xué)手段,研究TPA/ATRA對胃癌細(xì)胞MAPK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中一些激酶的調(diào)節(jié)作用,以及對細(xì)胞周期調(diào)控因子的調(diào)節(jié)作用.為進(jìn)一步了解胃癌發(fā)生及發(fā)展的可能機(jī)制提供理論依據(jù).首先,用MTT法檢測TPA/RA對BGC-823細(xì)胞生長的作用,發(fā)現(xiàn)TPA和ATRA均有效地抑制BGC-823細(xì)胞生長,且具有濃度依賴性,說明TPA/ATRA在BGC-823的生長抑制中存在著協(xié)同作用.進(jìn)一步檢測TPA/

2、ATRA對細(xì)胞周期分布的影響,發(fā)現(xiàn)大量細(xì)胞滯留在G0/G1期,共同處理時,阻斷效應(yīng)也相應(yīng)增強(qiáng),表明TPA/ATRA對胃癌細(xì)胞生長的抑制作用與細(xì)胞滯留在G0/G1期有關(guān).為此,采用western blot法檢測TPA/ATRA對一些重要的G1/S期調(diào)控蛋白表達(dá)水平的影響.結(jié)果表明:cyclinD1與CDK2穩(wěn)定表達(dá),不被調(diào)控;TPA/ATRA處理時,cyclinE和磷酸化的RB蛋白水平呈下調(diào)趨勢,共同作用時,基本抑制CyclinE的表達(dá),

3、但對pRb抑制的協(xié)同作用不明顯;TPA以時間依賴方式上調(diào)P21waf1和P53的蛋白表達(dá),與ATRA共同處理時,上調(diào)趨勢增強(qiáng).表明TPA/ATRA可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期調(diào)控分子的蛋白表達(dá)水平,抑制cyclin-CDK激酶活性,使Rb蛋白去磷酸化,誘導(dǎo)細(xì)胞滯留在G0/G1期,從而抑制細(xì)胞的生長.其次,我們前期研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),BGC-823細(xì)胞經(jīng)TPA處理后發(fā)生凋亡,呈現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)變化.該文進(jìn)一步檢測JNK蛋白表達(dá),TPA處理后,JNK水平

4、迅速上升,3h時達(dá)到最高峰,其后略有下降,但蛋白表達(dá)水平始終高于對于對照組.檢測c-jun mRNA的表達(dá),觀察到類似的現(xiàn)象.瞬時轉(zhuǎn)染和CAT assay檢測,觀察到TPA以劑量依賴的方式上調(diào)AP-1蛋白的轉(zhuǎn)錄活性.用PKC抑制劑wortamanin預(yù)處理細(xì)胞后,TPA誘導(dǎo)的JNK的蛋白表達(dá)量低于TPA單獨(dú)處理組,細(xì)胞凋亡數(shù)量也同樣遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于TPA單獨(dú)處理組,說明TPA通過PKC途徑激活JNK.以上結(jié)果不僅證實(shí)TPA誘導(dǎo)的凋亡與通過PKC

5、途徑激活的JNK相關(guān),而且顯示BGC-823細(xì)胞中JNK途徑對于TPA誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡是必需的.綜上所述,該論文工作表明,TPA一方面激活JNK途徑,誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子AP-1的轉(zhuǎn)錄活性,啟動一系列凋亡相關(guān)基因的表達(dá),誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡;另一方面通過ERK途徑將生長抑制信號傳遞至細(xì)胞中,通過調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)因子的表達(dá),使Rb蛋白去磷酸化而導(dǎo)致細(xì)胞滯留在G0/G1期,從而抑制胃癌細(xì)胞生長;ATRA則主要通過ERK和P38途徑傳遞生長抑制信號,產(chǎn)生與

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